背景[1-3]
大鼠表皮角化細胞分離自大鼠表皮組織，大鼠表皮角化細胞主要分布于表皮基底層，在上皮程序性死亡后，細胞產(chǎn)生角化并移向表皮。體外培養(yǎng)的表皮角化細胞容易導(dǎo)致終末分化，不能充分增殖。表皮覆蓋皮膚和粘膜表面，作為機體抵抗外界刺激的道防御性屏障，具有其他器官不可替代的重要生理功能。角質(zhì)形成細胞可產(chǎn)生粘附分子和細胞因子，與天然免疫和體內(nèi)穩(wěn)態(tài)相關(guān)。角化是角朊細胞的一個重要特征。從基層細胞開始，角朊細胞不斷分化，向上移行，經(jīng)歷棘層、顆粒層，最終成為角層細胞而完成其角化過程。
人類表皮最下層的基底層細胞先后變?yōu)槎嘟切蔚募毎?、扁平含有嗜堿性顆粒的顆粒細胞、扁平的無細胞核及細胞器的角質(zhì)細胞。這一過程一般需要28至45天。表皮的分化過程受多方面因素的控制，很易被干擾。凡能引起基底細胞分裂和分化的因素都可引起角化過度和角化不全。角質(zhì)形成過度或角質(zhì)堆積，可使角質(zhì)層角化過度。角化過程不完全或角化異常，導(dǎo)致角化不全及角化不良。形成皮膚角化過度的癥狀。
應(yīng)用[4][5]
用于NB-UVB對角質(zhì)形成細胞角蛋白17表達的調(diào)控作用及其機制研究
銀屑病是一種臨床常見的易復(fù)發(fā)的慢性炎性皮膚病，其發(fā)病率較高，全球發(fā)病率約為0.1-4.0%。
目前銀屑病的發(fā)病機制尚不十分明確，與環(huán)境和遺傳等多種因素有關(guān)。以往研究發(fā)現(xiàn)銀屑病相關(guān)角蛋白17（K17）在銀屑病皮損區(qū)呈特異性高表達，并且通過“K17-T細胞-細胞因子”自身免疫環(huán)路的形式參與銀屑病的發(fā)病和疾病的進展。
窄譜中波紫外線（NB-UVB）是臨床常用的治療銀屑病的方法，具有安全、有效、副作用小的特點。
通過體內(nèi)及體外實驗探討不同劑量NB-UVB對角質(zhì)形成細胞K17表達的調(diào)控作用及其機制。
方法不同劑量NB-UVB照射角質(zhì)形成細胞細胞系，照射后培養(yǎng)12h用AnnexinV/PI檢測細胞凋亡，照射后6、12、24h用CCK8法測定細胞活性，透射電鏡觀察細胞骨架變化，Real-time PCR和Western-blot用于檢測K17mRNA和蛋白表達影響以及其對ERK1/2、STAT3、STAT1、P38、AKT、P65磷酸化活性的影響；
分離培養(yǎng)原代角質(zhì)形成細胞，采用熒光實時定量PCR、Western印跡以及K17免疫熒光等方法對以上結(jié)果進行驗證；
采用咪喹莫特誘導(dǎo)銀屑病樣皮炎小鼠模型，H&E染色檢測不同劑量NB-UVB照射后表皮病理變化，熒光實時定量PCR、Western印跡、K17免疫熒光和免疫組化檢測NB-UVB對小鼠表皮組織K17mRNA和蛋白表達的影響。
參考文獻
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[2]UVB-induced anti-survival and pro-apoptotic effects on HaCaT human keratinocytesvia caspase-and PKC-dependent downregulation of PKB,HIAP-1,Mcl-1,XIAP andER stress[J].Yu-Kyoung Park,Byeong-Churl Jang.International Journal of Molecular Medicine.2014(3)
[3]Disseminated molluscum contagiosum in a patient on methotrexate therapy for psoriasis[J].Shivani Bansal,Vineet Relhan,Esha Roy,Vijay Garg,Nita Khurana.Indian Journal of Dermatology,Venereology,and Leprology.2014(2)
[4]Keratin 17:A Critical Player in the Pathogenesis of Psoriasis[J].Liang Jin,Gang Wang.Med.Res.Rev..2014(2)
[5]韓昌旭.NB-UVB對角質(zhì)形成細胞角蛋白17表達的調(diào)控作用及其機制研究[D].第四軍醫(yī)大學(xué),2014.