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小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞的應(yīng)用

2021/4/9 11:44:12

背景[1-3]

小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞是一株能分泌鼠類(lèi)甾類(lèi)激素、分泌型腎上腺皮質(zhì)激素的細(xì)胞系。

腎上腺皮質(zhì)是構(gòu)成腎上腺外層的內(nèi)分泌腺組織。它能分泌由數(shù)種類(lèi)固醇混合而成的腎上腺皮質(zhì)激素,皮質(zhì)內(nèi)還含有為數(shù)更多的類(lèi)固醇。腎上腺皮質(zhì)由3層構(gòu)成,最外層為球狀帶(zona glomerulosa),接著為占大部分的束狀帶(zona fasciculata),內(nèi)層為網(wǎng)狀帶(zona seticularis)。其功能異??梢砸鹉I上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)、腎上腺皮質(zhì)功能減退、腎上腺皮質(zhì)增生等。

小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞

腎上腺皮質(zhì)的組織結(jié)構(gòu)可以分為三層,自外向內(nèi)分為球狀帶、束狀帶和網(wǎng)狀帶。球狀帶腺細(xì)胞排列成短環(huán)狀或球狀。這一層較薄,主要分泌鹽皮質(zhì)激素,人主要為醛固酮。束狀帶位于皮質(zhì)中間,腺細(xì)胞排列成垂直于腺體表面呈束狀。這層較厚,構(gòu)成皮質(zhì)的大部分。網(wǎng)狀帶位于皮質(zhì)最內(nèi)層,腺細(xì)胞排列不規(guī)則。

腎上腺皮質(zhì)癌(adrenocortical carcinoma)甚少見(jiàn),一般為功能性,發(fā)現(xiàn)時(shí)一般比腺瘤大,重量常超過(guò)100g,呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng),正常腎上腺組織破壞或被淹沒(méi),向外侵犯周?chē)窘M織甚至該側(cè)腎。小的腺癌可有包膜。切面棕黃色,常見(jiàn)出血、壞死及囊性變。鏡下分化差者異型性高,瘤細(xì)胞大小不等,并可見(jiàn)怪形核及多核,核分裂像多見(jiàn)。

應(yīng)用[4][5]

用于類(lèi)固醇生成因子-1及DAX-1與腎上腺皮質(zhì)腫瘤研究

檢測(cè)SF-1、DAX-1mRNA在腎上腺皮、髓質(zhì)腫瘤以及正常腎上腺皮質(zhì)中的表達(dá),初步探討SF-1、DAX-1在腎上腺腫瘤尤其是醛固酮分泌瘤中的作用。

方法:1、用TRIZOL分別提取腎上腺醛固酮分泌瘤(APA,n=17),包括血管緊張素Ⅱ(AⅡ)無(wú)反應(yīng)的醛固酮分泌瘤(AⅡ-U-APA,n=12)和血管緊張素Ⅱ有反應(yīng)的醛固酮分泌瘤,(AⅡ-R-APA,n=5)、腎上腺醛固酮皮質(zhì)癌(n=2)、腎上腺皮質(zhì)醇分泌瘤(n=10)、腎上腺無(wú)功能瘤(n=10)、腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤(PHEO,n=6)和正常腎上腺皮質(zhì)(n=8)組織的總RNA;

2、實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)上述不同組織中SF-1、DAX-1、ACTH-R基因和內(nèi)參照β-actin mRNA的表達(dá);

3、比較SF-1、DAX-1、ACTH-R mRNA在上述不同組織中的表達(dá)差異,并與腎上腺皮質(zhì)腫瘤患者的臨床資料行相關(guān)性分析。

結(jié)果:1.SF-1 mRNA在腎上腺皮質(zhì)腫瘤中的表達(dá)1)在APA中表達(dá)和正常腎上腺皮質(zhì)相比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,SF-1/β-actin mRNA比值分別為23.89±3.17(AⅡ-U-APA)、21.59±3.00(AⅡ-R-APA)和24.58±2.45(正常腎上腺皮質(zhì))(p>0.05);

2) 在皮質(zhì)醇分泌瘤中表達(dá)(14.17±2.80)明顯低于正常腎上腺皮質(zhì)及APA,差異有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p均<0.01);

3) 在腎上腺無(wú)功能瘤中表達(dá)(36.38±3.50),明顯高于正常腎上腺皮質(zhì)、APA和皮質(zhì)醇分泌瘤(p均<0.01);4)2例腎上腺分泌醛固酮的腎上腺皮質(zhì)癌中表達(dá)(分別為38.75和44.16)有明顯高于其他各組的趨勢(shì)。

參考文獻(xiàn)

[1]Five novel mutations in steroidogenic factor 1(SF1,NR5A1)in 46,XY patients with severe underandrogenization but without adrenal insufficiency.Kohler B,Lin L,Ferraz-de-Souza B,et al.Human Mutation.2008

[2]DNA binding and transcriptional repression by DAX-1 blocks steroidogenesis.Zazopoulos E,Lalli E,Stocco D M,et al.Nature.1997

[3]The murine Dax-1 promoter is stimulated by SF-1(steroidogenic factor-1)and inhibited by COUP-TF(chicken ovalbumin upstream promoter-transcription factor)via a composite nuclear receptor-regulatory element.Yu RN,Ito M,Jameson JL.Journal of Molecular Endocrinology.1998

[4]DAX-1 Blocks Steroid Production at Multiple Levels.Lalli E,Michael H.Melner,Douglas M.Stocco,et al.The Journal of Endocrinology.1998

[5]曹彩霞.類(lèi)固醇生成因子-1及DAX-1與腎上腺皮質(zhì)腫瘤[D].中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué),2009.

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