人游離β絨毛膜促性腺激素(f-βhCG)Elisa試劑盒是一種用于定量檢測樣本中f-βhCG含量的科研工具。同時也是定量檢測孕婦血清中f-βhCG水平的工具，是產(chǎn)前篩查的重要檢測工具。唐氏綜合征是最常見的染色體數(shù)目異常疾病，目前尚無有效治療方法，產(chǎn)前篩查是降低其出生率的關(guān)鍵措施。人游離β絨毛膜促性腺激素(f-βhCG)Elisa試劑盒能定量檢測孕婦血清中f-βhCG水平的工具，與甲胎蛋白(AFP)聯(lián)合應(yīng)用，已成為孕中期唐氏綜合征篩查的重要手段。
唐氏綜合征（Down syndrome，DS）又稱21-三體綜合征，活嬰發(fā)病率約為1/600～1/800[1]?；颊弑憩F(xiàn)為智力低下、生長發(fā)育遲緩及多發(fā)畸形，給家庭和社會帶來沉重負(fù)擔(dān)。長期以來，臨床以孕婦年齡≥35歲作為高危篩查指標(biāo)，但檢出率僅約30%，且80%的DS患兒出生于35歲以下孕婦，因此亟需更高效的篩查方法[2]。研究表明，孕育DS胎兒的孕婦在孕中期血清中的人游離β絨毛膜促性腺激素(f-βhCG)水平可顯著升高，而甲胎蛋白(AFP)水平則偏低[1]。通過聯(lián)合檢測這兩項(xiàng)指標(biāo)，結(jié)合孕婦年齡、孕周、體重等參數(shù)進(jìn)行風(fēng)險評估，可將DS檢出率提高至60%～80%[2]。
檢測原理
人游離β絨毛膜促性腺激素(f-βhCG)Elisa試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定原理。試劑盒的酶標(biāo)板微孔內(nèi)預(yù)包被了針對f-βhCG的特異性捕獲抗體。加入待測孕婦血清樣本或標(biāo)準(zhǔn)品后，樣本中的f-βhCG抗原與捕獲抗體結(jié)合；隨后加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體，形成“抗體-抗原-酶標(biāo)抗體”復(fù)合物；最后加入TMB底物顯色，顯色深度與樣本中f-βhCG濃度呈正相關(guān)，通過酶標(biāo)儀在450nm波長處測定吸光度值，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計算出精確濃度。
臨床應(yīng)用
多項(xiàng)研究證實(shí)，應(yīng)用人游離β絨毛膜促性腺激素(f-βhCG)Elisa試劑盒聯(lián)合AFP檢測可有效篩查DS高危孕婦。對2849例孕中期孕婦（14～20周）進(jìn)行血清篩查，采用磁性分離酶免疫測定技術(shù)，結(jié)果篩出DS高危312例，陽性率10.95%，其中174例接受羊水染色體檢查確診2例DS患兒，隨訪中另發(fā)現(xiàn)1例篩查陽性但拒絕產(chǎn)前診斷者娩出DS患兒，1例低風(fēng)險漏檢，最終檢出率為75%，與文獻(xiàn)報道的60%～80%基本一致[1]。
另一研究中采用時間分辨免疫熒光法對871例孕婦篩查，DS高危39例，陽性率4.5%，經(jīng)羊水或臍血染色體檢查確診1例47,XXX胎兒和2例21-三體綜合征（其中1例為低風(fēng)險漏檢）。該研究指出，人游離β絨毛膜促性腺激素(f-βhCG)是孕中期血清篩查中最敏感的指標(biāo)，在12例異常胎兒中，有10例f-βhCG表現(xiàn)為升高異常（>2.5 MoM）[2]。
又一研究中使用人游離β絨毛膜促性腺激素(f-βhCG)Elisa試劑盒篩查358例孕婦，DS高危15例，陽性率4.19%，接受羊水穿刺的10例中診斷21-三體游離型1例、易位型1例。同時檢出神經(jīng)管缺陷高危20例，陽性率5.59%，經(jīng)B超和追蹤發(fā)現(xiàn)開放性神經(jīng)管畸形1例、流產(chǎn)3例[3]。同時發(fā)現(xiàn)孕婦血清f-βhCG水平隨孕周增加而下降，呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。
注意事項(xiàng)
孕周估算偏差10～14天可使風(fēng)險率相差10倍[1]，對月經(jīng)不規(guī)律者應(yīng)用B超核實(shí)孕周。目前多數(shù)軟件基于歐美人群數(shù)據(jù)開發(fā)，可能不適用于中國人群，建議選用基于本國產(chǎn)婦數(shù)據(jù)開發(fā)的軟件[1]。然后人游離β絨毛膜促性腺激素(f-βhCG)Elisa試劑盒篩查并非100%準(zhǔn)確，部分DS胎兒表現(xiàn)為低風(fēng)險，應(yīng)告知孕婦有漏檢可能[3]。另外對篩查高危者必須進(jìn)行羊水細(xì)胞染色體核型分析或B超確診，避免僅憑篩查結(jié)果做終止妊娠決定[2]。
參考文獻(xiàn)
[1] 張振宇, 王群, 顧菊萍. 孕中期婦女血清AFP、F-βhCG測定篩查唐氏綜合征[J]. 中國優(yōu)生與遺傳雜志, 2005, 13(10): 45-46.
[2] 方超英, 王華, 金明華, 等. 孕中期血清AFP、F-βHCG篩查唐氏綜合征[J]. 中國醫(yī)師雜志, 2002, (6): 635-637.
[3] 胡錫階, 瑩, 方寧, 等. 孕中期血清標(biāo)志物AFP、F-βhCG在唐氏綜合征和神經(jīng)管缺陷篩查中的意義[J]. 遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報, 2007, 30(2): 136-137.