胰蛋白酶為蛋白酶的一種，EC3.4.21.4。在脊椎動物中，作為消化酶而起特點。在胰臟是作為酶的前體胰蛋白酶原而被合成的。作為胰液的成分而分泌，受腸激酶，或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶，是肽鏈內(nèi)切酶，它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切斷。它不僅起消化酶的特點，而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體，起活化特點。是特異性最強的蛋白酶，在決定蛋白質(zhì)的氨基酸排列中，它成為不可缺少的工具。

胰蛋白酶屬于絲氨酸蛋白酶類，能特異性地作用于肽鏈Lys或Arg殘基的羧基端。在生理上參與了動物體內(nèi)的新陳代謝、消化、凝血等功能的重要過程。在細胞生物學領域，胰蛋白酶能使細胞膜與培養(yǎng)皿結(jié)合處蛋白降解，使得兩者分離。并且由于細胞自身內(nèi)部細胞骨架的張力以及培養(yǎng)液表面張力的作用下成為球形，從而實現(xiàn)細胞的消化。ADI不作限制性規(guī)定(FAO/WHO，2001)。本試劑盒應采用雙抗體夾心法測定血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中的含量。1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。 2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。 3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。 4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。 5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。 6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融. 7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。1. 標準品的加樣：設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；。 2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。 3. 加酶：每孔加入酶標試劑100μl，空白孔除外。 4. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。 5. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。 6. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。 7. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 8. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。 9. 測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。白色結(jié)晶狀物質(zhì)或凍干粉，溶于水，不溶于有機溶劑，pI10.5，最適pH值7.5-8.5。穩(wěn)定性：pH值為2-3時最穩(wěn)定。抑制劑有二異丙基氟磷酸(DFP)、苯甲基磺酰氟(PMSF)、對甲苯磺酰賴氨酸氯甲基酮(TLCK)、天然的胰蛋白酶抑制劑、絲蛋白酶抑制劑、巨球蛋白：α₂、Ag⁺。激活劑為Ca²⁺，能阻滯胰蛋白酶的自溶，促進胰蛋白酶原的激活。底物專一性是帶正電荷的賴氨酸與精氨酸的側(cè)鏈，產(chǎn)物是羧端為賴氨酸或精氨酸的肽，酶反應優(yōu)先水解精氨酸、賴氨酸。用于生化研究，蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)分析和序列研究，蛋白質(zhì)的消化和分解，臨床上常用于治療各種炎癥、潰瘍、創(chuàng)傷、血腫、水腫、癬疥及其他皮膚疾患，也可用于治療肺氣腫、支氣管炎等疾病。用于外科上各種潰瘍和發(fā)炎壞疽、創(chuàng)傷唑損傷、瘺孔等產(chǎn)生的水腫、蟲腫胰蛋白酶可作為蛋白分解酶。外科主要用各種潰瘍、炎癥、創(chuàng)傷、壞疽、瘺引起的局部膿腫、水腫、亦用于毒蛇咬傷等癥；皮膚科主要用治療癬疥及其他皮疾患。內(nèi)科主要用于膿胸、肺氣腫、支氣管炎、支氣管喘息等癥。但是用藥后可能引起寒戰(zhàn)、發(fā)熱、頭痛、胸痛、腹痛、呼吸困難、皮疹、血管神經(jīng)性水腫、眼壓升高、白細胞減少等不良反應，罕見過敏性休克。肌注部位易引起疼痛和硬結(jié)。不可用于出血空腔、急性炎癥，肺出血一周以內(nèi)的病人禁用。結(jié)核性膿胸、氣管胸膜瘺患者慎用。肝、腎損傷、血凝機能異常和出血情況的患者忌用。
臨用前，加氯化鈉注射適量使溶解。肌肉注射：局部注入或噴霧吸入，用量視病情決定。酶制劑。主要用于焙烤、肉類嫩化、蛋白質(zhì)水解等。生化研究。白色或類白色冷凍干粉或結(jié)晶。是胰臟絲氨酸蛋白酶。易溶于水，不溶于有機溶劑。蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)分析和序列研究，蛋白質(zhì)的消化和分解。重組胰蛋白酶具有與動物源性胰蛋白酶相同的酶學性質(zhì)?？商娲鹊鞍酌甘褂?，且有很多優(yōu)勢，如無雜酶活性，高穩(wěn)定性，不自切，高活性；在使用中，無非特異性酶切片段及自切片段出現(xiàn)。用于特異性的蛋白質(zhì)酶解、蛋白測序、制作肽譜圖、蛋白質(zhì)組學研究、Z-D膠上的肽段的胰酶消化等。由豬或牛的胰腺抽提而得。以牛胰為原料，首先制得胰蛋白酶原，活化后經(jīng)硫酸銨分級沉淀，再經(jīng)重結(jié)晶、透析的產(chǎn)品。