人支氣管平滑肌細(xì)胞永生化
| 中文名稱 | 人支氣管平滑肌細(xì)胞永生化 |
|---|---|
| 中文同義詞 | 人支氣管平滑肌細(xì)胞永生化;人支氣管平滑肌細(xì)胞永生化 YB-7011HIC |
| 英文名稱 | Immortalization of human bronchial smooth muscle cells |
| 英文同義詞 | Immortalization of human bronchial smooth muscle cells |
| CAS號(hào) | |
| 分子式 | |
| 分子量 | 0 |
| EINECS號(hào) | |
| 相關(guān)類別 | |
| Mol文件 | Mol File |
| 結(jié)構(gòu)式 |
人支氣管平滑肌細(xì)胞永生化 性質(zhì)
平滑肌即無(wú)紋肌的通稱,平滑肌是由長(zhǎng)紡錘形的單核細(xì)胞構(gòu)成。它不構(gòu)成獨(dú)立的器官,而只是成為構(gòu)成體壁和內(nèi)臟壁的因素(肌層)。平滑肌細(xì)胞互相連接,形成管狀結(jié)構(gòu)或中空器官;在功能上可以通過(guò)縮短和產(chǎn)生張力使器官發(fā)生運(yùn)動(dòng)和變形,也可產(chǎn)生連續(xù)收縮或緊張性收縮,使器官對(duì)抗所加負(fù)荷而保持原有的形狀,支氣管平滑肌細(xì)胞的收縮、舒張、增殖和凋亡與臨床許多疾病的病理生理過(guò)程有關(guān),如支氣管哮喘、慢性阻塞性肺疾病等。例如在哮喘發(fā)病時(shí),可以檢測(cè)到氣管平滑肌發(fā)生數(shù)目的增生和肥大,表型也發(fā)生改變,由收縮型轉(zhuǎn)為合成型與分泌型,并分泌多種與細(xì)胞因子;而且出現(xiàn)向氣管腔遷移的跡象1) 細(xì)胞來(lái)源于人正常支氣管組織。
2) 細(xì)胞鑒定:平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽(yáng)性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭狀細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s,吸走潤(rùn)洗的PBS;3.T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層;4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;5.消化到細(xì)胞間隙變大,但未完全脫落時(shí)加2-3ml完全培養(yǎng)基終止胰酶消化;6.混勻細(xì)胞,900rpm離心3-5min,棄上清;7.加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;8.補(bǔ)足完全培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);1:2傳代人正常支氣管組織貼壁生長(zhǎng)長(zhǎng)梭形細(xì)胞樣
2) 細(xì)胞鑒定:平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽(yáng)性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭狀細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s,吸走潤(rùn)洗的PBS;3.T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層;4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;5.消化到細(xì)胞間隙變大,但未完全脫落時(shí)加2-3ml完全培養(yǎng)基終止胰酶消化;6.混勻細(xì)胞,900rpm離心3-5min,棄上清;7.加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;8.補(bǔ)足完全培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);1:2傳代人正常支氣管組織貼壁生長(zhǎng)長(zhǎng)梭形細(xì)胞樣