青黛提取物
青黛提取物 性質
青黛提取物以爵床科植物馬藍Baphicacanthus cusia (Nees)Bremek.、蓼科植物蓼藍Polygonum tinctorium Ait.或十字花科植物菘藍Isatis indigotica Fort.的葉或莖葉為原料提取，含靛玉紅、靛藍、異靛藍、色氨酮、青黛酮等成分。具有抗菌、抗癌等藥理活性。本信息是由Chemicalbook的侍艷編輯整理。【基源】為爵床科植物馬藍Baphicacanthus cusia (Nees)Bremek.、蓼科植物蓼藍Polygonum tinctorium Ait.或十字花科植物菘藍Isatis indigotica Fort.的葉或莖葉。
【別名】靛花，青蛤粉，青缸花。
【生境分布】生于林下或溪旁陰濕地。分布于臺灣、福建、湖南、華南和西南；野生或栽培。
【植物形態(tài)】馬藍 葉片長圓形，長5～15cm，灰綠色。葉端漸尖，基部楔形下延，葉緣有細小鈍鋸齒。
蓼藍 一年生草本，高50～80cm。莖直立，有分枝，具棱和明顯的節(jié)，節(jié)處帶紫紅色。單葉互生，托葉鞘圓筒狀，具長緣毛，葉片卵形至寬橢圓形，先端圓鈍，基部漸狹，全緣，藍綠色，干后藍黑色。穗狀花序頂生或腋生，長4～8cm，苞片長約3mm，花淡紅色，密集，花被片5。瘦果卵形，有 3棱，褐色，包于宿存的花被?；ㄆ?～8 月，果期8～9月。
菘藍 二年生草本，高40～90cm; 無毛或稍有柔毛，莖直立，上部多分枝，稍帶粉霜。葉互生，基生葉較大，矩圓狀橢圓形，長5～20cm，寬2～9cm，有柄; 莖生葉矩圓形至矩圓狀披針形，長5～7cm，寬 1～4cm，先端鈍，基部箭形，半抱莖，全緣或有不明顯鋸齒。復總狀花序生于枝端，萼片4，綠色，花瓣4，黃色。短角果矩圓形，扁平，邊緣有翅，紫色，無毛。種子1 枚，橢圓形，褐色。花期4～5月，果期5～ 6月。
圖1為青黛從菘藍葉制成的青黛中分出靛藍 (Indigotin ，Indigo)、靛玉紅 (Indirubin )、青黛酮 (Qingdainone )、正二十九烷、吲哚醌(Isatin)、色胺酮 (Tryptanthrin)、青黛素 (Qingdain)。從蓼藍葉加工成的青黛中分出靛藍、靛玉紅、N-苯基 -2-萘胺(N-Phenyl-2-naphthylamine)、β-谷甾醇、蟲漆蠟醇(Laccerol)。從馬藍葉制成的青黛中分出靛玉紅、異靛藍 (Isoindigo)。具有清熱解毒，涼血消斑，清肝瀉火，定驚之效。
靛藍：分子式C16H10N2O2，分子量262.26，金屬光澤的深藍色粉末，300℃升華。溶于水、乙醇、甲醇、稀酸。
靛玉紅：分子式C16H10N2O2，分子量262.26，紅色針狀結晶(丙酮-丁酮)，熔點356～358℃，可升華，略溶于乙醇、醋酸，不溶于水。
靛玉紅具有抗癌作用，臨床治療慢性粒細胞性白血病。1.抗菌作用
青黛乙醇浸出液0.5g/mL體外試驗對炭疽桿菌、肺炎桿菌、志賀氏痢疾桿菌、霍亂弧菌、金黃色葡萄球菌和白色葡萄球菌均有抑制作用。青黛成分色胺酮對羊毛狀小孢子菌、斷發(fā)癬菌、紅色癬菌、絮狀表皮癬菌有抑制作用，其最小抑菌濃度為5μg/mL。
2.對免疫功能的影響
青黛及靛玉紅對小白鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能有一定的促進作用。對荷瘤小鼠巨噬細胞吞噬也有促進作用。對慢?；颊叩耐淌杉毎δ?、E-玫瑰花結形成率及雙鏈酶反應無抑制作用，甚或增強。靛玉紅200mg/kg，連續(xù)6天，能增強荷瘤大鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞的作用;100～200mg/kg灌胃，連續(xù)43～60天，對豚鼠OT皮試、PHA 引起淋巴細胞轉化、巨噬細胞吞噬作用均無明顯影響。
3.抗腫瘤作用
青黛及靛玉紅對治療慢性粒細胞白血病有效。靛玉紅對大鼠W256實體瘤和小鼠Lewis肺癌、乳腺癌有一定的抑制作用。每日皮下和腹腔注射靛玉紅200mg/kg，連續(xù) 6～7天，結果對大鼠W256實體瘤的抑制率分別為47%～50%和50%～58%。靛玉紅500mg/ kg灌胃對大鼠W256實體瘤的抑制率為23%～33%，對小鼠肉瘤180的抑制率約30%。靛玉紅能延長淋巴白血病L7212小鼠的生存時間20%左右。靛玉紅能抑制癌細胞及人的急、慢性粒細胞性白血病細胞的DNA的合成，使慢?；颊咄庵馨准毎心懝檀剂字戎怠?′-核苷酸酶、 cAMP量從低值上升至正常，或接近正常，由白細胞Ph′染色體則從高值顯著下降，在白細胞驟降期的骨髓細胞中出現(xiàn)大量的幼稚細胞變性、壞死，這主要是通過細胞及胞核溶解而發(fā)生，故能破壞白血病細胞，患者骨髓細胞的DNA合成受抑制，尤以中幼粒細胞為明顯。長期應用對粒、紅系統(tǒng)細胞DNA合成均有抑制作用。靛玉紅的衍生物N、N′-二甲基靛玉紅、N-甲基靛玉紅甲肟、N-甲基靛玉紅肟甲醚、N-乙?；逵窦t對W256均有抑制作用，其化療指數(shù)(LD50/ ID50) 分別為5.6、11、>4、2.5，均大于靛玉紅 (化療指數(shù)為2.23)。
4.其他作用
靛藍對四氯化碳所致小鼠肝損害有一定的保護作用。青黛散對小鼠和大鼠實驗性胃潰瘍有抗?jié)冏饔?，能減少潰瘍面積，抑制胃蛋白酶活性，降低胃液酸度，具有較好的抗胃潰瘍作用。1.青黛及靛玉紅治療慢性粒細胞白血病有效。靛玉紅有破壞白血病細胞的作用。從超微結構形態(tài)來看，在靛玉紅作用下，變性壞死的細胞多呈腫脹、溶解性壞死。青黛提取物靛玉紅對白血病L7212和Lewis肺癌細胞有直接抑制作用。靛玉紅能延長淋巴白血病L7212小鼠的生存時間20%左右。
2.靛玉紅對大鼠W256實體瘤和小鼠Lewis肺癌、乳腺癌有一定的抑制作用。每日皮下和腹腔注射靛玉紅200mg/kg，連續(xù)6～7日，結果對大鼠W256實體瘤的抑制率分別為47%～50%和50%～58%。皮下量減少到每日100mg/kg以下時，其抑制作用不明顯。靛玉紅500mg/kg口服，對大鼠W256實體瘤的抑制率為23%～33%，對小鼠肉瘤S180的抑制率為30%。灌服靛玉紅可延長腹水型W256大鼠的生存時間43%。 500ml/kg灌胃，每日1次連續(xù)9～10次，對C57BL系小鼠乳腺癌亦有一定抑制作用。
3.靛玉紅對艾氏腹水癌、肝癌腹水型有抑制作用。靛玉紅能提高正常和荷瘤動物的單核巨噬細胞系統(tǒng)的吞噬功能，可以通過提高機體免疫功能而發(fā)揮其抗癌作用。性狀鑒別
為深藍色的極細粉末，體輕，易飛揚，或呈不規(guī)則多孔性的團塊，用手捻之即為細末。投水中浮于水面。微有草腥氣，味淡。以粉細，色藍，體輕能浮于水面，火燒之產生紫紅色煙霧的時間較長者為佳。
理化鑒別
(1)取本品少量，用微火灼燒，產生紫紅色的煙霧。
(2)取本品少量，滴加硝酸，產生氣泡并顯棕紅色或黃棕色。
(3)取本品粉末0.5g，加水10ml，振搖后放置片刻，水層不得顯深藍色。
(4)取本品50mg，加氯仿5ml，充分攪拌，濾過，作為供試品溶液。另取靛藍和靛玉紅對照品，加氯仿制成每1ml各含1mg的混合溶液，作為對照品溶液。吸取上述二種溶液各5～10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯-氯仿-丙酮 (5：4：1) 展開。供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，分別顯相同的藍色斑點和淺紫紅色斑點。
紫外光譜鑒別
青黛的紫外可見光譜
取樣品0.4g，置索氏提取器中，加氯仿50ml水浴加熱提取至無色，提取液放冷后置100ml 容量瓶中，用氯仿稀釋至刻度，于日立UV-320型紫外可見分光光度計上測定其紫外光譜。結果青黛在610nm波長處有最大吸收峰。
圖2為青黛的紫外可見光譜圖青黛中靛藍和靛玉紅的含量測定
色譜條件
色譜柱：Lichrosorb RP-C18柱(250mm×2.6mm，10μm);流動相：甲醇-水(60：40);流速：1.5ml/min;檢測波長：292nm;柱溫：室溫;內標：色胺酮。
供試品的制備
取本品細粉(150℃干燥2h)約30～80mg，精確稱定，加氯仿50ml，置80℃水浴上回流提取20～30min;冷卻，靜置，取上清液，樣品殘渣再分次用氯仿提取至無色，合并提取液至100ml量瓶中，加內標，加氯仿至刻度。按本法色譜條件進行測定。
圖3為青黛中靛藍和靛玉紅的HPLC圖
1內標；2靛藍；3靛玉紅
圖4為青黛中靛藍和靛玉紅的含量測定結果(μg/mg)靛玉紅小鼠腹腔注射的LD50為1.1～2.0g/kg。小鼠灌胃5g/kg，連續(xù)5天，觀察1周，結果未見動物發(fā)生死亡和出現(xiàn)明顯毒性反應。亞急性毒性試驗： 給犬分別灌胃靛玉紅20、100、200mg/kg連續(xù)6個月，結果小劑量組的食欲和生長情況與對照組相似，大、中劑量組出現(xiàn)食欲減少、腹瀉、便血以及SGPT升高和灶性肝細胞壞死等反應。但3個劑量組的血象、骨髓象都未見明顯抑制，對腎功能、心電圖也無影響。有報道復方青黛丸可引起急性肝功損害、便血、潰瘍性結腸炎、陰道出血等。內服青黛及靛玉紅可出現(xiàn)消化系統(tǒng)的反應，如惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉、便血等，其次是骨髓抑制引起血小板減少。長期服用靛玉紅，少數(shù)病人出現(xiàn)肺動脈高壓及心功能不全癥狀，停藥后可逐漸恢復。給小鼠灌胃靛玉紅后，血中濃度逐漸升高，12小時達到高峰，1天后緩慢下降，維持較長時間。體內分布以肝、膽、胃、腸為最高。生物利用度為46.48%。靛玉紅靜注或灌胃給藥均在肝膽代謝，再隨糞便排出體外，給藥96小時從糞便排出量占給藥量的 76.03%。【性味歸經】味咸，性寒。入肝、肺、胃經。
【功能主治】清熱解毒，涼血、定驚。用于溫毒發(fā)斑，血熱吐衄，胸痛咳血，口瘡，痄腮，喉痹，小兒驚癇。
【別名】靛花，青蛤粉，青缸花。
【生境分布】生于林下或溪旁陰濕地。分布于臺灣、福建、湖南、華南和西南；野生或栽培。
【植物形態(tài)】馬藍 葉片長圓形，長5～15cm，灰綠色。葉端漸尖，基部楔形下延，葉緣有細小鈍鋸齒。
蓼藍 一年生草本，高50～80cm。莖直立，有分枝，具棱和明顯的節(jié)，節(jié)處帶紫紅色。單葉互生，托葉鞘圓筒狀，具長緣毛，葉片卵形至寬橢圓形，先端圓鈍，基部漸狹，全緣，藍綠色，干后藍黑色。穗狀花序頂生或腋生，長4～8cm，苞片長約3mm，花淡紅色，密集，花被片5。瘦果卵形，有 3棱，褐色，包于宿存的花被?；ㄆ?～8 月，果期8～9月。
菘藍 二年生草本，高40～90cm; 無毛或稍有柔毛，莖直立，上部多分枝，稍帶粉霜。葉互生，基生葉較大，矩圓狀橢圓形，長5～20cm，寬2～9cm，有柄; 莖生葉矩圓形至矩圓狀披針形，長5～7cm，寬 1～4cm，先端鈍，基部箭形，半抱莖，全緣或有不明顯鋸齒。復總狀花序生于枝端，萼片4，綠色，花瓣4，黃色。短角果矩圓形，扁平，邊緣有翅，紫色，無毛。種子1 枚，橢圓形，褐色。花期4～5月，果期5～ 6月。
圖1為青黛從菘藍葉制成的青黛中分出靛藍 (Indigotin ，Indigo)、靛玉紅 (Indirubin )、青黛酮 (Qingdainone )、正二十九烷、吲哚醌(Isatin)、色胺酮 (Tryptanthrin)、青黛素 (Qingdain)。從蓼藍葉加工成的青黛中分出靛藍、靛玉紅、N-苯基 -2-萘胺(N-Phenyl-2-naphthylamine)、β-谷甾醇、蟲漆蠟醇(Laccerol)。從馬藍葉制成的青黛中分出靛玉紅、異靛藍 (Isoindigo)。具有清熱解毒，涼血消斑，清肝瀉火，定驚之效。
靛藍：分子式C16H10N2O2，分子量262.26，金屬光澤的深藍色粉末，300℃升華。溶于水、乙醇、甲醇、稀酸。
靛玉紅：分子式C16H10N2O2，分子量262.26，紅色針狀結晶(丙酮-丁酮)，熔點356～358℃，可升華，略溶于乙醇、醋酸，不溶于水。
靛玉紅具有抗癌作用，臨床治療慢性粒細胞性白血病。1.抗菌作用
青黛乙醇浸出液0.5g/mL體外試驗對炭疽桿菌、肺炎桿菌、志賀氏痢疾桿菌、霍亂弧菌、金黃色葡萄球菌和白色葡萄球菌均有抑制作用。青黛成分色胺酮對羊毛狀小孢子菌、斷發(fā)癬菌、紅色癬菌、絮狀表皮癬菌有抑制作用，其最小抑菌濃度為5μg/mL。
2.對免疫功能的影響
青黛及靛玉紅對小白鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能有一定的促進作用。對荷瘤小鼠巨噬細胞吞噬也有促進作用。對慢?；颊叩耐淌杉毎δ?、E-玫瑰花結形成率及雙鏈酶反應無抑制作用，甚或增強。靛玉紅200mg/kg，連續(xù)6天，能增強荷瘤大鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞的作用;100～200mg/kg灌胃，連續(xù)43～60天，對豚鼠OT皮試、PHA 引起淋巴細胞轉化、巨噬細胞吞噬作用均無明顯影響。
3.抗腫瘤作用
青黛及靛玉紅對治療慢性粒細胞白血病有效。靛玉紅對大鼠W256實體瘤和小鼠Lewis肺癌、乳腺癌有一定的抑制作用。每日皮下和腹腔注射靛玉紅200mg/kg，連續(xù) 6～7天，結果對大鼠W256實體瘤的抑制率分別為47%～50%和50%～58%。靛玉紅500mg/ kg灌胃對大鼠W256實體瘤的抑制率為23%～33%，對小鼠肉瘤180的抑制率約30%。靛玉紅能延長淋巴白血病L7212小鼠的生存時間20%左右。靛玉紅能抑制癌細胞及人的急、慢性粒細胞性白血病細胞的DNA的合成，使慢?；颊咄庵馨准毎心懝檀剂字戎怠?′-核苷酸酶、 cAMP量從低值上升至正常，或接近正常，由白細胞Ph′染色體則從高值顯著下降，在白細胞驟降期的骨髓細胞中出現(xiàn)大量的幼稚細胞變性、壞死，這主要是通過細胞及胞核溶解而發(fā)生，故能破壞白血病細胞，患者骨髓細胞的DNA合成受抑制，尤以中幼粒細胞為明顯。長期應用對粒、紅系統(tǒng)細胞DNA合成均有抑制作用。靛玉紅的衍生物N、N′-二甲基靛玉紅、N-甲基靛玉紅甲肟、N-甲基靛玉紅肟甲醚、N-乙?；逵窦t對W256均有抑制作用，其化療指數(shù)(LD50/ ID50) 分別為5.6、11、>4、2.5，均大于靛玉紅 (化療指數(shù)為2.23)。
4.其他作用
靛藍對四氯化碳所致小鼠肝損害有一定的保護作用。青黛散對小鼠和大鼠實驗性胃潰瘍有抗?jié)冏饔?，能減少潰瘍面積，抑制胃蛋白酶活性，降低胃液酸度，具有較好的抗胃潰瘍作用。1.青黛及靛玉紅治療慢性粒細胞白血病有效。靛玉紅有破壞白血病細胞的作用。從超微結構形態(tài)來看，在靛玉紅作用下，變性壞死的細胞多呈腫脹、溶解性壞死。青黛提取物靛玉紅對白血病L7212和Lewis肺癌細胞有直接抑制作用。靛玉紅能延長淋巴白血病L7212小鼠的生存時間20%左右。
2.靛玉紅對大鼠W256實體瘤和小鼠Lewis肺癌、乳腺癌有一定的抑制作用。每日皮下和腹腔注射靛玉紅200mg/kg，連續(xù)6～7日，結果對大鼠W256實體瘤的抑制率分別為47%～50%和50%～58%。皮下量減少到每日100mg/kg以下時，其抑制作用不明顯。靛玉紅500mg/kg口服，對大鼠W256實體瘤的抑制率為23%～33%，對小鼠肉瘤S180的抑制率為30%。灌服靛玉紅可延長腹水型W256大鼠的生存時間43%。 500ml/kg灌胃，每日1次連續(xù)9～10次，對C57BL系小鼠乳腺癌亦有一定抑制作用。
3.靛玉紅對艾氏腹水癌、肝癌腹水型有抑制作用。靛玉紅能提高正常和荷瘤動物的單核巨噬細胞系統(tǒng)的吞噬功能，可以通過提高機體免疫功能而發(fā)揮其抗癌作用。性狀鑒別
為深藍色的極細粉末，體輕，易飛揚，或呈不規(guī)則多孔性的團塊，用手捻之即為細末。投水中浮于水面。微有草腥氣，味淡。以粉細，色藍，體輕能浮于水面，火燒之產生紫紅色煙霧的時間較長者為佳。
理化鑒別
(1)取本品少量，用微火灼燒，產生紫紅色的煙霧。
(2)取本品少量，滴加硝酸，產生氣泡并顯棕紅色或黃棕色。
(3)取本品粉末0.5g，加水10ml，振搖后放置片刻，水層不得顯深藍色。
(4)取本品50mg，加氯仿5ml，充分攪拌，濾過，作為供試品溶液。另取靛藍和靛玉紅對照品，加氯仿制成每1ml各含1mg的混合溶液，作為對照品溶液。吸取上述二種溶液各5～10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯-氯仿-丙酮 (5：4：1) 展開。供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，分別顯相同的藍色斑點和淺紫紅色斑點。
紫外光譜鑒別
青黛的紫外可見光譜
取樣品0.4g，置索氏提取器中，加氯仿50ml水浴加熱提取至無色，提取液放冷后置100ml 容量瓶中，用氯仿稀釋至刻度，于日立UV-320型紫外可見分光光度計上測定其紫外光譜。結果青黛在610nm波長處有最大吸收峰。
圖2為青黛的紫外可見光譜圖青黛中靛藍和靛玉紅的含量測定
色譜條件
色譜柱：Lichrosorb RP-C18柱(250mm×2.6mm，10μm);流動相：甲醇-水(60：40);流速：1.5ml/min;檢測波長：292nm;柱溫：室溫;內標：色胺酮。
供試品的制備
取本品細粉(150℃干燥2h)約30～80mg，精確稱定，加氯仿50ml，置80℃水浴上回流提取20～30min;冷卻，靜置，取上清液，樣品殘渣再分次用氯仿提取至無色，合并提取液至100ml量瓶中，加內標，加氯仿至刻度。按本法色譜條件進行測定。
圖3為青黛中靛藍和靛玉紅的HPLC圖
1內標；2靛藍；3靛玉紅
圖4為青黛中靛藍和靛玉紅的含量測定結果(μg/mg)靛玉紅小鼠腹腔注射的LD50為1.1～2.0g/kg。小鼠灌胃5g/kg，連續(xù)5天，觀察1周，結果未見動物發(fā)生死亡和出現(xiàn)明顯毒性反應。亞急性毒性試驗： 給犬分別灌胃靛玉紅20、100、200mg/kg連續(xù)6個月，結果小劑量組的食欲和生長情況與對照組相似，大、中劑量組出現(xiàn)食欲減少、腹瀉、便血以及SGPT升高和灶性肝細胞壞死等反應。但3個劑量組的血象、骨髓象都未見明顯抑制，對腎功能、心電圖也無影響。有報道復方青黛丸可引起急性肝功損害、便血、潰瘍性結腸炎、陰道出血等。內服青黛及靛玉紅可出現(xiàn)消化系統(tǒng)的反應，如惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉、便血等，其次是骨髓抑制引起血小板減少。長期服用靛玉紅，少數(shù)病人出現(xiàn)肺動脈高壓及心功能不全癥狀，停藥后可逐漸恢復。給小鼠灌胃靛玉紅后，血中濃度逐漸升高，12小時達到高峰，1天后緩慢下降，維持較長時間。體內分布以肝、膽、胃、腸為最高。生物利用度為46.48%。靛玉紅靜注或灌胃給藥均在肝膽代謝，再隨糞便排出體外，給藥96小時從糞便排出量占給藥量的 76.03%。【性味歸經】味咸，性寒。入肝、肺、胃經。
【功能主治】清熱解毒，涼血、定驚。用于溫毒發(fā)斑，血熱吐衄，胸痛咳血，口瘡，痄腮，喉痹，小兒驚癇。