正常胚胎Psi2 DAP細胞是通過插入重組逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組（DAP）從Psi2細胞中獲得，細胞可以產(chǎn)生一種可以感染小鼠細胞的載體，載體可以編碼人胎盤堿性磷酸酶基因和新霉素抗性基因。用Psi2-DAP細胞產(chǎn)生的載體感染的細胞表達組織化學可檢測的堿性磷酸酶，該堿性磷酸酶可作為體內(nèi)追蹤其命運的標記。Psi2 DAP細胞可能產(chǎn)生輔助病毒。Psi2 DAP細胞可以用于3D細胞培養(yǎng)。貼壁；成纖維細胞成纖維細胞樣(卵圓形，不規(guī)則形)1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s，吸走潤洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層；4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化；5.消化到細胞間隙變大，但未完全脫落時加2-3ml完全培養(yǎng)基終止胰酶消化；6.混勻細胞，900rpm離心3-5min，棄上清；7.加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里；8.補足完全培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；這株細胞生成一種可以感染小鼠細胞的載體。 Psi2 DAP細胞生成的載體編碼了人類胎盤堿性磷酸酯酶基因和新霉素抗性基因。 這株細胞通過Psi2細胞插入一個重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒(DAP)基因組衍生而來。 被這種Psi2 DAP產(chǎn)生的載體感染的細胞表達的磷酸酯酶可用組織化學方法檢測，可以用作體內(nèi)追蹤他們命運的標記。 這些細胞也可能產(chǎn)生輔助病毒。1:2-1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定）Psi2 DAP(小鼠胚胎成纖維細胞)“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增3～6次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)／100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2％～0.5％，腫瘤細胞可達3～5％。接種2～3天分裂增殖旺盛，是活力zui好時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。貼壁細胞