FITC標(biāo)記山羊抗兔IgG(H+L)用純化的兔IgG免疫山羊，然后用親和純化柱對獲得的抗血清進(jìn)行純化，并經(jīng)過人IgG吸附純化的優(yōu)質(zhì)二抗。對人IgG幾乎沒有結(jié)合能力。該FITC標(biāo)記山羊抗兔IgG(H+L)片段化兔抗山羊二抗是用胃蛋白酶消化IgG去除Fc部分，剩下兩個靠二硫鍵連接的結(jié)合抗原的Fab部分，依然是二價的；FITC標(biāo)記山羊抗兔IgG(H+L)片段形式的二抗可避免與Protein A/G或與Fc受體的結(jié)合，還由于其分子本身比較好，更容易滲透入細(xì)胞組織結(jié)構(gòu)內(nèi)而靈敏度更高。FITC是一種常用的綠色熒光探針。FITC（Fluorescein Isothiocyanate，異硫氰酸熒光素）純品為黃色或橙黃色結(jié)晶粉末，易溶于水和酒精溶劑。FITC分子量為389。4，最大吸收光波長為490～495nm，最大發(fā)射光波長為520～530nm，呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光。FITC在冷暗干燥處可保存多年，是目前應(yīng)用最廣泛的熒光素。FITC性質(zhì)穩(wěn)定，能與蛋白質(zhì)結(jié)合，是檢測組織細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)最常用的熒光探針。它還能標(biāo)記抗體，可用于免疫組織化學(xué)單染或多重染色。FITC熒光二抗主要優(yōu)點是人眼對黃綠色較為敏感，通常切片標(biāo)本中的綠色熒光少于紅色。缺點是在光照下易淬滅，易受自發(fā)熒光影響。