I-BET-762是一種BET (bromodomain and extra terminal domain)蛋白抑制劑， IC50約為35 nM，抑制巨噬細(xì)胞產(chǎn)生促炎蛋白，抑制急性炎癥，對其他溴區(qū)結(jié)合域包含的蛋白具有高度的選擇性。I-BET-762抑制BET(溴區(qū)和額外的末端結(jié)構(gòu)域) 蛋白, BRD2, BRD3 和 BRD4, 結(jié)合到BET的串聯(lián)溴區(qū)，K_d為50.5-61.3 nM, 在FRET分析中，置換BET串聯(lián)溴區(qū)的一種四乙?；腍4肽，IC50為32.5-42.5 nM。I-BET-762占據(jù)BET蛋白的乙?；?賴氨酸結(jié)合口袋，并抑制BET蛋白結(jié)合到乙?；慕M蛋白，從而破壞了炎性基因表達(dá)必不可少的染色質(zhì)復(fù)合物的形成。分化過程中的第2天使用I-BET-762處理，改變CD4⁺T細(xì)胞的細(xì)胞因子產(chǎn)生，上調(diào)一些抗炎基因產(chǎn)物的表達(dá)，并下調(diào)一些促炎細(xì)胞因子的表達(dá)。I-BET-762保護(hù)防止脂多糖誘導(dǎo)的內(nèi)毒素休克和細(xì)菌誘導(dǎo)的膿毒病。LPS注射后1.5小時，單劑量I-BET處理，可治愈小鼠。I-BET每日兩次注射，持續(xù)2天，保護(hù)小鼠免于膿毒癥引起的死亡。早期I-BET-762處理實驗性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）小鼠模型，抑制Th1分化的2D2 T細(xì)胞誘發(fā)神經(jīng)性炎癥的能力。Molibresib (I-BET-762, GSK525762, GSK525762A) 是一種BET蛋白抑制劑，無細(xì)胞試驗中IC50約為35 nM，抑制巨噬細(xì)胞產(chǎn)生促炎性蛋白質(zhì)，并抑制急性炎癥，對其他溴區(qū)結(jié)合域包含的蛋白具有高度選擇性。

Target	Value
BET proteins (Cell-free assay)	35 nM

I-BET-762抑制BET(溴區(qū)和額外的末端結(jié)構(gòu)域) 蛋白, BRD2, BRD3 和 BRD4, 結(jié)合到BET的串聯(lián)溴區(qū)，K _d 為50.5-61.3 nM, 在FRET分析中，置換BET串聯(lián)溴區(qū)的一種四乙?；腍4肽，IC50為32.5-42.5 nM。I-BET-762占據(jù)BET蛋白的乙?；?賴氨酸結(jié)合口袋，并抑制BET蛋白結(jié)合到乙?；慕M蛋白，從而破壞了炎性基因表達(dá)必不可少的染色質(zhì)復(fù)合物的形成。分化過程中的第2天使用I-BET-762處理，改變CD4

I-BET-762保護(hù)防止脂多糖誘導(dǎo)的內(nèi)毒素休克和細(xì)菌誘導(dǎo)的膿毒病。LPS注射后1.5小時，單劑量I-BET處理，可治愈小鼠。I-BET每日兩次注射，持續(xù)2天，保護(hù)小鼠免于膿毒癥引起的死亡。早期I-BET-762處理實驗性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）小鼠模型，抑制Th1分化的2D2 T細(xì)胞誘發(fā)神經(jīng)性炎癥的能力。

實施例1：將(S)-2-(6-(4-氯苯基)-8-甲氧基-1-甲基-4H-苯并[f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮雜卓-4-基)乙酸（16.0 g，40 mmol）溶于THF中，加入N,N-二異丙基乙胺（DIEA，14 mL，80 mmol），隨后加入1-[雙(二甲氨基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化六氟磷酸鹽（HATU，30.4 g，80 mmol）。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時，然后加入乙胺的THF溶液（40 mL，2 M，80 mmol）。繼續(xù)攪拌48小時后，減壓濃縮反應(yīng)混合物。將粗產(chǎn)物懸浮于水中，用二氯甲烷（DCM）萃取。有機層用無水硫酸鈉（Na2SO4）干燥，過濾后減壓濃縮。粗產(chǎn)物通過硅膠柱色譜（DCM/MeOH，95:5）純化，所得固體在乙腈（MeCN）中重結(jié)晶。隨后，將固體溶解于DCM中，并用二異丙醚（1-Pr2O）沉淀，得到(S)-2-(6-(4-氯苯基)-8-甲氧基-1-甲基-4H-苯并[f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮雜卓-4-基)-N-乙基乙酰胺（8 g，收率47%）為白色固體。Rf = 0.48（DCM/MeOH，90:10）。熔點 >140°C（變粘）。1H NMR（300 MHz，CDCl3）δ 7.53-7.47（m，2H），7.39（d，J = 8.9 Hz，1H），7.37-7.31（m，2H），7.20（dd，J = 2.9，8.9 Hz，1H），6.86（d，J = 2.9 Hz，1H），6.40（m，1H），4.62（m，1H），3.80（s，3H），3.51（dd，J = 7.3，14.1 Hz，1H），3.46-3.21（m，3H），2.62（s，3H），1.19（t，J = 7.3 Hz，3H）。LC/MS：m/z 424 [M(35Cl)+H]+，保留時間2.33分鐘。

參考文獻(xiàn)：

[1] Patent: WO2011/54553, 2011, A1. Location in patent: Page/Page column 26

[2] Patent: WO2011/54845, 2011, A1. Location in patent: Page/Page column 55-56

[3] Patent: US2012/220573, 2012, A1. Location in patent: Page/Page column 11-12

[4] Journal of Medicinal Chemistry, 2013, vol. 56, # 19, p. 7501 - 7515