VPS34酶活性對于哺乳動物細胞中LC3的脂化是十分必要的。PIK-III在哺乳動物細胞中是一種強力的細胞自噬以及LC3脂化的抑制劑。在H4細胞中，當自噬反應(yīng)被mTOR抑制劑AZD8055誘導(dǎo)時，PIK-III可抑制自溶酶體的形成、在基礎(chǔ)水平上提高LC3的胞質(zhì)信號。在CCCP-誘導(dǎo)的線粒體自噬模型中，PIK-III抑制線粒體的清除。在H4和PSN1細胞中，PIK-III的處理導(dǎo)致LC3-I水平的上升。在Panc10.05細胞中，PIK-III同時升高LC3-II和LC3-I的水平。

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實施例10a-10v合成4'-(環(huán)丙基甲基)-N-吡啶-4-基-4,5'-聯(lián)嘧啶-2,2'-二胺的一般方法。制備4'-(環(huán)丙基甲基)-N-吡啶-4-基-[4,5']聯(lián)嘧啶基-2,2'-二胺（10a）：向(3Z)-1-環(huán)丙基-4-(二甲基氨基)-3-[2-(吡啶-4-基氨基)嘧啶-4-基]丁-3-烯-2-酮（9）（80 mg，0.247 mmol）的DMF（2.061 mL）溶液中加入鹽酸胍（35.3 mg，0.371 mmol）和碳酸鉀（103 mg，0.742 mmol），將反應(yīng)混合物在60℃下加熱4小時。粗產(chǎn)物通過反相HPLC [30-90%有機相經(jīng)15分鐘]純化，隨后使用Biotage硅膠色譜[10 g SNAP柱，100% DCM至12% MeOH/DCM]進一步純化，得到目標產(chǎn)物為白色固體（24.72 mg，31.3%收率）。1H NMR（400 MHz, MeOD）δ ppm 0.01-0.14（m, 2H）, 0.39（q, J = 6.06 Hz, 2H）, 0.94-1.10（m, 1H）, 2.87（d, J = 7.07 Hz, 2H）, 7.10（d, J = 5.05 Hz, 1H）, 7.83（d, J = 6.57 Hz, 2H）, 8.30（d, J = 6.57 Hz, 2H）, 8.41（s, 1H）, 8.57（d, J = 5.05 Hz, 1H）。HRMS（ES+）C17H17N7H+ [MH+]的計算值：320.1624；實測值：320.1636。UV-LC：在254/214 nm下100% UV純度；tR = 4.67分鐘，總運行時間7.75分鐘。

參考文獻：

[1] Patent: WO2012/85815, 2012, A1. Location in patent: Page/Page column 61

[2] ACS Medicinal Chemistry Letters, 2016, vol. 7, # 1, p. 72 - 76