雪旺細(xì)胞RSC96細(xì)胞是原代提取大鼠的外周神經(jīng)系統(tǒng)雪旺細(xì)胞經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)后自發(fā)轉(zhuǎn)化而成的。RSC96細(xì)胞環(huán)核苷酸磷酸二酯酶1（Cnp1）、（CNPase）陽(yáng)性；層粘連蛋白陽(yáng)性；髓鞘相關(guān)糖蛋白（Mag）蛋白和mRNA陰性；髓鞘堿性蛋白（Mbp）蛋白和mRNA陰性；髓鞘蛋白零（Mpz）（Charcot Marie Tooth神經(jīng)病1B）蛋白和mRNA陰性；外周髓鞘蛋白22（Pmp22）mRNA陽(yáng)性，蛋白陰性；S100鈣結(jié)合蛋白β（神經(jīng)）（S100b）蛋白陽(yáng)性。2002年12月提交到ATCC的RSC96細(xì)胞污染了支原體，后代細(xì)胞通過(guò)BM細(xì)胞周期蛋白處理21天消除支原體。處理后6周，用Hoechst染色、PCR和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)測(cè)試進(jìn)行支原體檢測(cè)，結(jié)果都呈陰性。貼壁；神經(jīng)元神經(jīng)細(xì)胞樣(梭形或圓形有觸角)1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s，吸走潤(rùn)洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層；4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化；5.消化到細(xì)胞間隙變大，但未完全脫落時(shí)加2-3ml完全培養(yǎng)基終止胰酶消化；6.混勻細(xì)胞，900rpm離心3-5min，棄上清；7.加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里；8.補(bǔ)足完全培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；該細(xì)胞是原代培養(yǎng)的大鼠雪旺細(xì)胞經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)后自發(fā)轉(zhuǎn)化而成的。2002年十二月提交到ATCC的培養(yǎng)物污染了支原體。 其后代通過(guò)BM 細(xì)胞周期蛋白處理21天消除支原體。 處理后六周，用Hoechst染色、PCR和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)測(cè)試進(jìn)行支原體檢測(cè)，結(jié)果都呈陰性。1:2-1:4（具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定）RSC96(大鼠雪旺細(xì)胞)“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中，細(xì)胞培增3～6次。細(xì)胞傳代后，一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度，即細(xì)胞群的分裂相數(shù)／100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2％～0.5％，腫瘤細(xì)胞可達(dá)3～5％。接種2～3天分裂增殖旺盛，是活力zui好時(shí)期，稱(chēng)指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期)，適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。雪旺細(xì)胞；自發(fā)永生貼壁細(xì)胞