LLC小鼠肺癌細(xì)胞是從小鼠肺癌組織中分離并培養(yǎng)成的穩(wěn)定原代細(xì)胞系,商品化的小鼠肺癌細(xì)胞LLC主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、LLC小鼠肺癌細(xì)胞promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC等細(xì)胞系。

LLC細(xì)胞是一種從C57BL小鼠的肺中建立的細(xì)胞系,該小鼠攜帶由原發(fā)性Lewis肝癌植入引起的腫瘤。LLC細(xì)胞對1, 3-雙-(2-氯乙基)-1-亞硝基脲有抗性,但對甲氨蝶呤敏感。據(jù)報(bào)道,LLC細(xì)胞具有高度致瘤性,可以在C57BL小鼠成瘤,但在小鼠中轉(zhuǎn)移性較弱。LLC細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中形成多層,但實(shí)際上沒有融合。LLC細(xì)胞鼠痘病毒陰性,被廣泛用作轉(zhuǎn)移模型,并有助于研究癌癥化療藥物的機(jī)制。
復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
上皮細(xì)胞樣(圓形或梭形、多角形)
LLC小鼠肺癌細(xì)胞可用于抑制Rac1減輕小鼠放射性肺損傷并增敏肺癌放療的作用與機(jī)制研究。
1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細(xì)胞10-20s,吸走潤洗的PBS;3.T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層;4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;5.消化到細(xì)胞間隙變大,但未完全脫落時(shí)加2-3ml完全培養(yǎng)基終止胰酶消化;6.混勻細(xì)胞,900rpm離心3-5min,棄上清;7.加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;8.補(bǔ)足完全培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定)
肺癌;C57BL/6
貼壁細(xì)胞