人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源于發(fā)育早期的中胚層和外胚層，屬于多能干細(xì)胞，MSCs可以在體內(nèi)或體外特定的誘導(dǎo)條件下，分化為脂肪、骨、軟骨、肌肉、肌腱、韌帶、神經(jīng)、肝、心肌、內(nèi)皮等多種組織細(xì)胞。

人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離來(lái)源組織的位置是人的骨髓。骨髓是位于人體骨骼內(nèi)部的一種柔軟、海綿狀的組織，它不僅是造血干細(xì)胞的主要來(lái)源，還富含多種類型的干細(xì)胞，其中就包括間充質(zhì)干細(xì)胞。在組織中的結(jié)構(gòu)方面，人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞通常呈梭形或紡錘形，具有活躍的增殖能力和多向分化潛能。它們的細(xì)胞核較大，細(xì)胞質(zhì)豐富，含有多種細(xì)胞器和生物活性物質(zhì)。這些細(xì)胞在骨髓中散在分布，與其他造血細(xì)胞等共同構(gòu)成骨髓的微環(huán)境。人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一種具有自我更新能力和多向分化潛能的干細(xì)胞，能在特定的體內(nèi)或體外環(huán)境下分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等多種類型的細(xì)胞。由于其易于分離、擴(kuò)增，且免疫原性低，人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在再生醫(yī)學(xué)、組織工程和細(xì)胞治療等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。在分離和培養(yǎng)方面，常用的方法有全骨髓法和密度梯度離心法等。全骨髓法是根據(jù)干細(xì)胞在低血清培養(yǎng)基中有貼壁優(yōu)勢(shì)特性，定期換液除去不貼壁細(xì)胞，從而達(dá)到純化及擴(kuò)增MSC的目的。密度梯度離心法則是根據(jù)骨髓中各細(xì)胞成分比重的不同，分離單核細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng)。通過(guò)這些方法，可以有效地從人骨髓中分離和培養(yǎng)出間充質(zhì)干細(xì)胞?？傊?，人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一種具有多向分化潛能的干細(xì)胞，具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。

人

骨髓貼壁生長(zhǎng)成纖維細(xì)胞樣

人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基(GIBCO，，添加NaHCO3 1.5g/L，丙酮酸鈉0.11g/L)；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

1）復(fù)蘇人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來(lái)。人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可以用于miR-155-5p調(diào)控Sort1參與人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化。