癌組織由實(shí)質(zhì)和間質(zhì)兩部分構(gòu)成，癌細(xì)胞構(gòu)成癌實(shí)質(zhì)，是癌的主要成分，具有組織來(lái)源特異性，癌間質(zhì)一般由結(jié)締組織和血管組成，起支持和營(yíng)養(yǎng)癌實(shí)質(zhì)的作用，不具有特異性，當(dāng)實(shí)體瘤超過(guò)1-2mm時(shí)，需要通過(guò)新生的血管和活化的癌相關(guān)成纖維細(xì)胞來(lái)獲取癌細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖所必須的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。其中，癌相關(guān)成纖維細(xì)胞可通過(guò)分泌多種細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子來(lái)發(fā)揮促進(jìn)癌血管生成的作用，上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）是一種胚胎發(fā)育期的表型轉(zhuǎn)化，在腫瘤轉(zhuǎn)移過(guò)程中也能觀察到相似的EMT過(guò)程。而由上皮和間質(zhì)相互作用所形成的腫瘤-宿主界面微環(huán)境的平衡狀態(tài)直接決定腫瘤的發(fā)生發(fā)展。多種因素可影響該界面，其中癌相關(guān)成纖維細(xì)胞是數(shù)量最豐富的基質(zhì)細(xì)胞，在調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞EMT過(guò)程中發(fā)揮重要作用。它通過(guò)細(xì)胞與細(xì)胞間相互接觸及分泌各種細(xì)胞因子、蛋白酶類(lèi)等，促進(jìn)上皮細(xì)胞及其細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化，并對(duì)界面各組分產(chǎn)生重要的調(diào)控作用1） 細(xì)胞來(lái)源于人手術(shù)胰腺癌組織。
2） 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
3） 細(xì)胞生長(zhǎng)方式：長(zhǎng)梭形，貼壁培養(yǎng)。1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s，吸走潤(rùn)洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層；4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化；5.消化到細(xì)胞間隙變大，但未完全脫落時(shí)加2-3ml完全培養(yǎng)基終止胰酶消化；6.混勻細(xì)胞，900rpm離心3-5min，棄上清；7.加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里；8.補(bǔ)足完全培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；1:2傳代人胰腺癌組織貼壁生長(zhǎng)長(zhǎng)梭形細(xì)胞樣