人雪旺細(xì)胞提取于人脊神經(jīng)組織,原代凍存。此細(xì)胞通過對(duì)S-100,GFAP和CD90免疫熒光染色驗(yàn)證,經(jīng)測(cè)試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

人雪旺細(xì)胞
人雪旺細(xì)胞是神經(jīng)系統(tǒng)中的重要膠質(zhì)細(xì)胞,它們沿著神經(jīng)元的突起(即軸突)分布,并緊密包裹在軸突的外面,形成髓鞘。這種髓鞘結(jié)構(gòu)有助于電信號(hào)的快速和有效傳遞。雪旺細(xì)胞在周圍神經(jīng)系統(tǒng)中尤為豐富,是構(gòu)成有髓神經(jīng)纖維的主要細(xì)胞成分。人雪旺細(xì)胞在神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育、維護(hù)和再生中起著至關(guān)重要的作用。它們能夠分泌多種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子和細(xì)胞外基質(zhì)成分,為神經(jīng)元的生長(zhǎng)和分化提供必要的支持。此外,雪旺細(xì)胞還參與調(diào)節(jié)神經(jīng)元的興奮性,確保神經(jīng)信號(hào)的準(zhǔn)確傳遞。在神經(jīng)受損時(shí),人雪旺細(xì)胞能夠響應(yīng)并啟動(dòng)修復(fù)機(jī)制。它們通過增殖、遷移和分泌生長(zhǎng)因子等方式,促進(jìn)受損神經(jīng)元的再生和功能恢復(fù)。因此,雪旺細(xì)胞在神經(jīng)再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。
雪旺細(xì)胞是神經(jīng)嵴的衍生物,形成了周圍神經(jīng)髓磷脂軸突的髓鞘。它環(huán)繞在末梢神經(jīng)軸突的軸上,沿著軸突節(jié)形成一層髓磷脂髓鞘。雪旺細(xì)胞對(duì)末梢神經(jīng)的發(fā)育、功能和再生起著重要作用。當(dāng)軸突快死亡時(shí),雪旺細(xì)胞環(huán)繞其周圍幫助消化軸突。連續(xù)的雪旺細(xì)胞形成一個(gè)空的管道,在其尾端形成新的軸突。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,完全脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
人源(Homo sapiens)
男(Male)
雪旺(Schwann)
采用胰蛋白酶 - 膠原酶混合消化法制備而來
貼壁生長(zhǎng)(Adherent)
28歲(28years)
成纖維細(xì)胞(Fibroblast)
叢狀神經(jīng)纖維瘤(Plexiform Neurofibroma)