mRNA提取試劑盒構(gòu)建cDNA文庫、蛋白質(zhì)的體外翻譯和RT-PCR方法檢測稀有的mRNA等研究常常需要從總RNA中分離mRNA，mRNA只占總RNA的1%左右，但由于帶poly（A）尾巴，所以可以通過與Oligo（dT）的親和結(jié)合而與其RNA（如rRNA、tRNA等）分離開。mRNA提取試劑盒包括一套用于固、液相分離的分離裝置；所述分離裝置中至少包含一層纖維素固相載體；該試劑盒還包括下述所有成份：至少有一管為細(xì)胞或組織裂解液；至少有一管為生物素化Oligo(dT)探針；至少有一管為結(jié)合緩沖液；至少有一管為洗脫緩沖液。該試劑盒操作簡便、快速、高效，適合用于生物樣品中mRNA的分離提取。其主要特征在于分離裝置中采用纖維素為固相載體，利用融合蛋白CBD-SA作為生物橋聯(lián)劑，以生物特異性偶聯(lián)法代替?zhèn)鹘y(tǒng)的物理吸附法和化學(xué)鍵合法活化纖維素固相載體，活化后的固相載體能夠高效率的結(jié)合生物素化的試劑，可用于蛋白或核酸的分離。常溫運(yùn)輸，4℃保存，Oligo(dT)纖維素低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。將0.5 mL結(jié)合液加入到一管裝有1 mg Oligo(dT)纖維素的離心管中，放置5分鐘后離心吸棄上清后待用。將制備的總RNA 100 μL加熱到65℃ 5分鐘后加入等體積的結(jié)合液，轉(zhuǎn)移到裝有Oligo(dT)纖維素的離心管中，顛倒混勻數(shù)次，離心后將上清轉(zhuǎn)移到一個離心管中。用0.5 mL結(jié)合液，混勻后4℃ 200 g 離心5分鐘，小心棄上清。重復(fù)上步洗3-5次，用RNase-free水洗脫mRNA，用微量核酸沉淀劑沉淀回收mRNA。