植物DNA試劑盒
植物DNA試劑盒 性質(zhì)
1、取植物新鮮組織約100 mg或干重組織約20 mg,加入液氮充分研磨。
2、將研磨后的粉末收集到離心管(自備)中,加入700μl 65℃預(yù)熱的Buffer GP1(使用前在預(yù)熱的Buffer GP1中加入β-巰基乙醇,使其終濃度為0.1%),迅速顛倒混勻后,將離心管置于65℃水浴20分鐘,水浴過程中顛倒離心管混勻樣品數(shù)次。
3、加入700μl氯仿,充分混勻,12000rpm(~~13400×g)離心5分鐘。
4、小心將上層水相轉(zhuǎn)入一新的離心管(自備)中,加入700μl Buffer GP2,充分混勻。
5、將步驟4中所得溶液全部加入到已裝入收集管的吸附柱DM中。若一次不能加完溶液,可分多次轉(zhuǎn)入。12000rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需進(jìn)一步提高DNA純度,可重復(fù)步驟7.
8、12000rpm離心2分鐘,倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫?cái)?shù)分鐘,以徹底晾干。
9、將吸附柱置于一個(gè)新的離心管(自備)中,向吸附柱的中間部位懸空加入50-100μlBuffer GE或滅菌水,室溫放置2-5分鐘,12000rpm離心1分鐘,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。