1201-99-6

111119-36-9

以2,4-二氯苯乙烯酸為原料合成L-2,4-二氯苯丙氨酸的一般步驟：通用方法：將適宜的醛（1j-1,1n或1o，0.5 mmol）、丙二酸（1.0 mmol）和哌啶（0.01 mmol）溶解于DMSO（500 mL）中，將混合物置于微波反應(yīng)器中加熱（60°C，30分鐘）。反應(yīng)完成后，冷卻至室溫，加入氨水溶液（9.5 mL，13% w/v，約7 M，通過(guò)緩慢加入干冰塊調(diào)節(jié)至pH 10.0），隨后加入過(guò)量的大腸桿菌BL21（DE3）細(xì)胞（400 mg濕細(xì)胞糊）以催化生成目標(biāo)產(chǎn)物L(fēng)-2,4-二氯苯丙氨酸。將懸浮液于37°C下攪拌數(shù)小時(shí)，反應(yīng)進(jìn)程通過(guò)HPLC監(jiān)測(cè)。產(chǎn)物分離時(shí)，用H2SO4水溶液（20% w/v）將反應(yīng)混合物酸化至pH <2.0，離心（8000 rpm，5分鐘）去除細(xì)胞及未轉(zhuǎn)化的底物沉淀。將Dowex 50WX8氫型樹脂（5.0 g）裝填于一次性塑料柱中，依次用去離子水（20 mL）和H2SO4水溶液（20 mL，5% w/v）洗滌。將生物轉(zhuǎn)化后的上清液以1 mL/min的流速上樣至樹脂柱。先用去離子水洗滌樹脂床至流出液呈中性，再用NH4OH水溶液（20 mL，5% w/v）洗脫產(chǎn)物。合并含產(chǎn)物的洗脫液，于離心蒸發(fā)器中干燥過(guò)夜，得到白色固體狀的L-苯丙氨酸衍生物（L-3j-1, L-3n或L-3o）。

參考文獻(xiàn)：

[1] Tetrahedron, 2016, vol. 72, # 46, p. 7256 - 7262