猴紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒
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- CAS號(hào):
- 英文名:
- Monkey Erythropoietin (EPO)ELISA Kit
- 英文別名:
- Monkey Erythropoietin (EPO)ELISA Kit
- 中文名:
- 猴紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒
- 中文別名:
- 猴紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒;猴促紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA檢測(cè)試劑盒
- CBNumber:
- CB012869635
- 分子式:
- 分子量:
- 0
- MOL File:
- Mol file
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猴紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒化學(xué)性質(zhì)
猴紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝
雙抗體夾心法
本試劑盒應(yīng)采用雙抗體夾心法測(cè)定血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中的含量。 ?
猴
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。 2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。 3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。 4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。 5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。 6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融. 7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。 ?
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；。 2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。 3. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑100μl，空白孔除外。 4. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。 5. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。 6. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。 7. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 8. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。 9. 測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。 ? ?
可檢測(cè)樣本中猴的EPO，且與其類似物無明顯交叉反應(yīng)。
促紅細(xì)胞生成素（EPO）又稱紅細(xì)胞刺激因子、促紅素，是一種內(nèi)源性糖蛋白激素，可刺激紅細(xì)胞生成。天然促紅細(xì)胞生成素分子包括多肽部分和糖鏈部分。血漿中存在的促紅細(xì)胞生成素由165個(gè)氨基酸組成。不同類型的促紅細(xì)胞生成素氨基酸多肽均一致，分子量為34kDa，由二硫鍵連接形成4個(gè)穩(wěn)定的α螺旋結(jié)構(gòu)，這是維持促紅細(xì)胞生成素生物活性所必須的空間構(gòu)象
猴紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒
上下游產(chǎn)品信息
上游原料
下游產(chǎn)品
猴紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒
生產(chǎn)廠家
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