L-鹽酸組氨酸一水物性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝
L-Histidine monohydrochloride monohydrate (L-Histidine hydrochloride hydrate, H-His-OH.HCl.H2O) 是必需氨基酸L-組氨酸的結(jié)構(gòu)類似物,是 protein biosynthesis 的可逆抑制劑,可引起培養(yǎng)中非致瘤細(xì)胞和致瘤細(xì)胞的不同反應(yīng)。
本試劑盒用于測定人血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中組氨酸鹽酸鹽(Histidine HCL)的含量。
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人組氨酸鹽酸鹽(Histidine HCL)水平。用純化的組氨酸鹽酸鹽(Histidine HCL)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入組氨酸鹽酸鹽(Histidine HCL) ,再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的組氨酸鹽酸鹽(Histidine HCL)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中組氨酸鹽酸鹽(Histidine HCL)含量。 ?
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。 2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。 3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。 4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。 6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 ?
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣:設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。 2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。 3. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑100μl,空白孔除外。 4. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。 5. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。 6. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。 7. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。 8. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。 9. 測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。 ? ?
化學(xué)性質(zhì)
白色晶體或結(jié)晶性粉末。無臭。稍有酸、苦味。約于250%:(干燥后)熔化并分解。性質(zhì)穩(wěn)定。水溶液呈酸性(pH值3.5~4.5)。易溶于水(39g/100ml,24℃),在水中的溶解度遠(yuǎn)比L-組氨酸大。不溶于乙醇和乙醚。
屬于準(zhǔn)必需氨基酸(嬰幼兒必需氨基酸),在人體內(nèi)合成較慢。如缺乏可導(dǎo)致發(fā)育遲緩、易生濕疹等癥狀。D-型與L-型生理效果相同。
用途
營養(yǎng)增補(bǔ)劑。人體內(nèi)合成速度較慢,為準(zhǔn)必需氨基酸??捎糜趶?qiáng)化嬰幼兒食品,外科手術(shù)后病人食品。用化學(xué)膨松劑制造面包時(shí),添加組氨酸、亮氨酸、精氨酸可改善香味。
用途
生化試劑,醫(yī)藥原料。
用途
組胺(histamine)的前體物質(zhì),依靠組氨酸脫羧酶(histidine decarboxylase)的催化
生產(chǎn)方法
由脫脂大豆水解物分離賴氨酸時(shí)的副產(chǎn)物。在堿性氨基酸中其堿性最弱,通過離子交換樹脂柱,即能與其他堿性氨基酸分離?;蚴蛊湫纬呻y溶的汞鹽、3,5-二氯苯磺酸鹽等而分離。
由血紅蛋白經(jīng)用鹽酸水解而得。
由發(fā)酵法制取。
L-鹽酸組氨酸一水物
上下游產(chǎn)品信息
上游原料
下游產(chǎn)品