SULFO CYANINE7 NHS ESTER性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝

熒光標(biāo)記染料

磺化Cy7是Cy7(Cyanine 7)的水溶型。它的光譜性質(zhì)和Cy7類似，屬近紅外熒光染料。由于它的熒光波長(zhǎng)（Em：774nm）恰好處于肌體組織近紅外窗口 I 的區(qū)域（肌體的血液，體液和組織此區(qū)域背景熒光弱，而長(zhǎng)波長(zhǎng)穿透性強(qiáng)），所以磺化Cy7常常應(yīng)用于小動(dòng)物活體體內(nèi)成像中?；腔疌y7熒光肉眼不可見(jiàn)，顯微鏡觀察時(shí)需要近紅外濾片，很多熒光顯微鏡（包括共聚焦顯微鏡）并不配備，但是流式細(xì)胞儀（flow cytometry）常常配備Cy7濾片組。磺化Cy7是常用熒光染料，磺化Cy7可以用來(lái)標(biāo)記核酸，蛋白，抗體，多肽等，它是最常見(jiàn)的小動(dòng)物顯影劑之一。
NHS活化酯 （N-羥基琥珀酰亞胺酯，N-hydroxysuccinimide ester，succinimidyl ester）是生物標(biāo)記反應(yīng)中最常用的活化基團(tuán)。它活化Cy7分子中的羧基，讓它可以和目標(biāo)生物分子上的胺基（伯胺或者仲胺）反應(yīng)生成穩(wěn)定的酰胺鍵，從而把磺化Cy7分子標(biāo)記到生物大分子上。由于游離胺基是蛋白，抗體，多肽表面的常見(jiàn)官能團(tuán)（來(lái)自于賴胺酸側(cè)鏈），磺化Cy7-NHS可以和它們直接反應(yīng)。核酸分子中天然不帶游離胺基，只有胺基修飾過(guò)的RNA或者DNA才可以和磺化Cy7-NHS反應(yīng)。
磺化Cy7-NHS活化酯的水溶性極高，所以在標(biāo)記反應(yīng)中不需要使用有機(jī)共溶劑，特別適合標(biāo)記蛋白等對(duì)有機(jī)溶劑敏感的生物分子。另外磺化Cy7水溶性極好，并且染料分子本身帶電荷，標(biāo)記到蛋白表面后不會(huì)引發(fā)疏水性蛋白聚集，提高熒光標(biāo)記產(chǎn)物的穩(wěn)定性。磺化Cy7-NHS也溶于甲醇，DMSO，DMF等有機(jī)溶劑，標(biāo)記反應(yīng)也可以在純有機(jī)溶劑中進(jìn)行。
磺化Cy7-NHS標(biāo)記后的產(chǎn)物Ex/Em是748/774nm。和它具有相似熒光特性的染料包括Alexa Fluor 750，DyLight 755等。

注意事項(xiàng)

• NHS ester基團(tuán)對(duì)濕度比較敏感，務(wù)必干燥保存產(chǎn)品。使用前產(chǎn)品需放到室溫回溫至少20分鐘。
• 使用不含氨基的緩沖體系。比如磷酸鈉緩沖液（PBS），Hepes緩沖液，碳酸氫鈉緩沖液；或硼酸緩沖液等。不要使用任何含伯胺或仲胺的緩沖液，比如Tris，甘氨酸等。高濃度咪唑(imidazole)也會(huì)影響反應(yīng)。
• 標(biāo)記反應(yīng)不要放在強(qiáng)光下，因?yàn)榇蟛糠譄晒饣衔镌趶?qiáng)光下長(zhǎng)時(shí)間照射會(huì)緩慢光漂泊(photobleaching)。

化學(xué)性質(zhì) 

外觀 :    深綠色固體
ex/em :    748/774 nm
消光系數(shù)(ε) :    200,000 L?mol?1?cm?1
量子產(chǎn)率(Φ) :    0.24

SULFO CYANINE7 NHS ESTER 上下游產(chǎn)品信息

上游原料

下游產(chǎn)品

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