GRNA文庫(kù)構(gòu)建性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝

概述

gRNA文庫(kù)的建立將為重要基因功能的篩選、疾病機(jī)制研究及藥物研發(fā)等方面提供新的動(dòng)力，大大加快人類功能基因組研究計(jì)劃的進(jìn)展。

gRNA 文庫(kù)質(zhì)控示例

小于12000個(gè)gRNA的文庫(kù)，10 fold覆蓋度 >75%，gRNA覆蓋度 >95%；
大于12000個(gè)gRNA的文庫(kù)，10 fold覆蓋度 >70%，gRNA覆蓋度 >90%。

基本原理

gRNA文庫(kù)構(gòu)建基本原理是通過一段與靶標(biāo)DNA相同的gRNA指導(dǎo)Cas9核酸酶對(duì)靶向基因進(jìn)行DNA修飾，以此造成基因的功能突變或缺失。在此基礎(chǔ)上，利用CRISPR/Cas9技術(shù)建立哺乳動(dòng)物全基因組突變庫(kù)或者與某類功能相關(guān)的基因突變體庫(kù)，通過功能性篩選和富集以及隨后的PCR擴(kuò)增和深度測(cè)序分析，發(fā)掘與篩選表型相關(guān)的基因，稱為CRISPR/Cas9 gRNA文庫(kù)篩選。

組成

gRNA文庫(kù)包括：全基因組文庫(kù)、lncRNA文庫(kù)、信號(hào)通路、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞增殖、離子通道、核受體相關(guān)、各種疾病相關(guān)等文庫(kù)。全基因組gRNA文庫(kù)的構(gòu)建可以針對(duì)任何類型的基因組DNA，包括ORF cDNA，lncRNA cDNA以及特定區(qū)域的cDNA片段等。能夠針對(duì)全長(zhǎng)cDNA乃至基因組DNA構(gòu)建高效的gRNA文庫(kù)，適用于高通量功能基因及相關(guān)藥物靶點(diǎn)篩選。

GRNA文庫(kù)構(gòu)建 上下游產(chǎn)品信息

上游原料

下游產(chǎn)品

GRNA文庫(kù)構(gòu)建 生產(chǎn)廠家

 

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