胞漿蛋白提取試劑盒性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝

用途

胞漿蛋白提取試劑盒用于哺乳動物組織和細胞中提取胞質(zhì)蛋白，試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑，作用較為溫和，可獲得蛋白，可用于免疫印跡實驗等基礎研究實驗，由于含有上述的酶抑制劑，不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。

操作方法

1、組織總蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF；混勻，放置在冰上備用；稱取0.1g的新鮮組織，放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處，用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎，然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液，研磨直至沒有明顯的組織塊，這個過程注意冰上操作；將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中，4 oC 12000g離心30min；吸取上清至新的管中；進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。
2、細胞總蛋白的提取
裂解液的用量：107個細胞需要裂解液1ml；
貼壁細胞：棄去培養(yǎng)基，用冷的PBS洗兩次，棄去PBS，然后加入計算好的細胞裂解液；在冰上用細胞刮刀進行刮離細胞，將刮離的細胞裂解液移入EP管中，顛倒裂解20-30min
懸浮細胞：4 oC 400g離心收集細胞，用冷的PBS洗兩次細胞，同樣按細胞數(shù)加入裂解液，渦旋10s，放置冰上裂解10min，重復3-4次；裂解完畢之后，將細胞裂解液4 oC 12000g離心30min；將上清移入新的EP管中；進行蛋白定量或者變性進行蛋白實驗。

胞漿蛋白提取試劑盒 上下游產(chǎn)品信息

上游原料

下游產(chǎn)品

胞漿蛋白提取試劑盒 生產(chǎn)廠家

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