堿性磷酸酶性質(zhì)、用途與生產(chǎn)工藝
堿性磷酸酶（英語：Alkaline phosphatase，簡稱ALP或ALKP） (EC 3.1.3.1)是一類水解酶，可在核苷酸、蛋白質(zhì)、生物堿等分子上去除磷酸基，進(jìn)行去磷酸化作用，在堿性環(huán)境下最為有效，故得名堿性磷酸酶。
堿性磷酸酶(ALP）是成骨細(xì)胞的一種外酶，它的表達(dá)活性是成骨細(xì)胞分化的一個明顯特征。堿性磷酸酶在機(jī)體中的主要生理功能是在成骨過程中水解磷酸酯，為羥基磷灰石的沉積提供必要的磷酸，同時水解焦磷酸鹽，解除其對骨鹽形成的抑制作用，有利于成骨作用。
堿性磷酸酶對醇，胺，焦磷酸鹽和酚的磷酸酯具有廣泛的特異性，并且它需要鋅和鎂或鈣二價離子來進(jìn)行活性。它可用于使酪蛋白和其他蛋白質(zhì)去磷酸化；也可用于使DNA或RNA的5'-末端去磷酸化以防止自身連接。在用其去磷酸化后，DNA或RNA也可以用放射性標(biāo)記的磷酸鹽（通過T4多核苷酸激酶）標(biāo)記。它用于與抗體和其他蛋白質(zhì)綴合，用于ELISA，Western印跡和組織化學(xué)檢測；通常用于使蛋白質(zhì)（例如酪蛋白）和核酸去磷酸化。當(dāng)需要高靈敏度時，它可用于蛋白質(zhì)標(biāo)記。
堿性磷酸酶是一種能夠?qū)?yīng)底物去磷酸化的酶，即通過水解磷酸單酯將底物分子上的磷酸基團(tuán)除去，并生成磷酸根離子和自由的羥基，這類底物包括核酸、蛋白、生物堿等。而該脫去磷酸基團(tuán)的過程被稱為去磷酸化或脫磷酸化。堿性磷酸酶是磷酸酶的一種，磷酸酶的作用與激酶的作用正相反，激酶是磷酸化酶，可以利用能量分子，如ATP，將磷酸基團(tuán)加到對應(yīng)底物分子上。堿性磷酸酶在堿性環(huán)境有最大活力，對來源于細(xì)菌中的ALP來說，其最適pH是8.0，而對來源于牛的ALP則是8.5。
本試劑盒根據(jù)熒光 PCR 技術(shù)原理，針對 PCR試劑盒設(shè)計特異性引物和 Taqman 探針，通過熒光 PCR 檢測儀進(jìn)行檢測，從而實現(xiàn)對 PCR試劑盒的檢測。
適用于 ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche480 等全自動熒光PCR 檢測儀。
1．樣本種類：鼻/咽拭子、痰液、支氣管肺泡灌洗液；培養(yǎng)物等樣品。 2．保存條件：采集的標(biāo)本應(yīng)及時送檢，24 小時內(nèi)檢測的應(yīng) 4℃保存，超過 24 小時的最好-70℃保存，并避免反復(fù)凍融。
化學(xué)性質(zhì)
白色凍干粉或3.2mol/L硫酸銨懸浮液，溶于水和稀緩沖液，pI5.7，最適pH值8.0-10.5(視底物而定)。穩(wěn)定性：懸浮液于4℃保存6個月，活性不變；凍干粉在氯化鈣真空干燥器中于0℃保存一年，活力損失40%。抑制劑有二價金屬離子的螯合劑(EDTA、草酸鹽、半胱氨酸、組氨酸、檸檬酸)、一乙醇銨、無機(jī)磷、Be
2+、芳香族氨基酸、尿素、碘乙酰胺、L-高精氨酸、高濃度的Zn
2+。激活劑有Tris緩沖劑、低濃度的Zn
2+、氨基醇(2-氨基-2-甲基，1-丙醇、二乙醇胺)、二價金屬離子(Mg
2+、Co
2+、Mn2
2+)。1%水溶液在278nm處的吸光系數(shù)為7.6。酶反應(yīng)：4-硝基苯磷酸鹽+H2O═4-硝基苯酚+無機(jī)磷。
用途
堿性磷酸酯酶可用于生化研究，適用于酶免疫測定技術(shù)的標(biāo)記，醫(yī)藥上常用作診斷酶。
生產(chǎn)方法
以小牛小腸黏膜為原料，勻漿、過濾后酸沉淀，用正丁醇抽提、乙醚和丙酮沉淀，再經(jīng)活性炭處理精制得堿性磷酸酶。
堿性磷酸酶
上下游產(chǎn)品信息
上游原料
下游產(chǎn)品