概述[1]
溴酚藍(lán)是一種淺黃色到棕黃色粉末；易溶于氫氧化鈉溶液，溶于甲醇、乙醇和苯，微溶于水(約0.4g/100ml)，吸收波長(zhǎng)422nm。其是一種pH指示劑，在pH3.0~4.6范圍，顏色由黃變藍(lán)；其也常用做電泳指示染料，凝膠中電泳遷移速度在小分子核酸或蛋白質(zhì)區(qū)域。在研究人血紅蛋白與各種動(dòng)物血紅蛋白相互作用(簡(jiǎn)稱互作)時(shí)，偶然發(fā)現(xiàn),溴酚蘭(BPB)在交叉電泳過程中也能與雞血紅蛋白發(fā)生互作,但BPB與成人血紅蛋白卻沒有此種現(xiàn)象。BPB與血紅蛋白不同,它是一種低分子化合物,其與血紅蛋白的互作,在機(jī)制上可能不同于血紅蛋白之間的相互作用。
應(yīng)用[2-4]
溴酚蘭應(yīng)用舉例如下：
1）制備一種用于氫離子識(shí)別的光化學(xué)復(fù)合敏感膜。方法的步驟如下：1)首先將55克丙烯酰胺溶于20-30毫升蒸餾水中，進(jìn)行過濾，然后將過濾后的液體冷卻至室溫，再進(jìn)行抽濾，待其結(jié)晶并自然晾干后，真空干燥，得到純丙烯酰胺；2)把10克純丙烯酰胺、0.04-0.05克的過硫酸銨、0.15-0.25克的N，N亞甲基丙烯酰胺、0.01-0.012克的亞甲酚紫、0.02-0.022克的溴酚蘭溶于蒸餾水中，用氮?dú)馊パ醪⒅鸩郊訙?，得到基于亞甲酚紫和溴酚蘭的H+離子敏感聚合物；3)使用高速離心機(jī)旋轉(zhuǎn)將上述聚合物形成光化學(xué)復(fù)合敏感膜。本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單、成本低，制備的敏感膜響應(yīng)速度、溫度特性、重復(fù)性好。能有效擴(kuò)大對(duì)氫離子的敏感范圍，可用于制造氫離子光化學(xué)傳感器的識(shí)別器的敏感部分。
2）制備一種具備補(bǔ)鈣功能的復(fù)合蛋白粉，包括以下原料及重量分?jǐn)?shù)：杏仁餅粕占總質(zhì)量比為30～40％；丙酮占總質(zhì)量比為1.5～2.5％；小蘇打溶液占總質(zhì)量比為8～15％；鹽酸占總質(zhì)量比為1.5～2.5％；溴酚蘭占總質(zhì)量比為1.5～2.5％；維生素D占總質(zhì)量比為12～18％；葡萄糖酸鈣占總質(zhì)量比為15～20％；乙醇占總質(zhì)量比為1.5～2.5％和蒸餾水占總質(zhì)量比為15～20％。本發(fā)明以杏仁餅粕為原料，使用丙酮和乙醇浸提，過濾、干燥的方法制備蛋白粉，葡萄糖酸鈣作為補(bǔ)鈣劑，使用此方法制作而成的復(fù)合蛋白粉不但感官質(zhì)量明顯改善，而且蛋白質(zhì)和葡萄糖酸鈣相互配合使用能大幅度提高使用效果，適合缺鈣中老年人食用。
3）制備一種預(yù)測(cè)磺脲類藥物療效的試劑盒，含有下述組分：(1)紅細(xì)胞裂解液；(2)白細(xì)胞裂解液；(3)蛋白沉淀液；(4)核酸儲(chǔ)存液；(5)PCR反應(yīng)混合液(含MgCl2、dNTP、PCR擴(kuò)增引物和內(nèi)標(biāo))；(6)DNA聚合酶；(7)陽(yáng)性質(zhì)控；(8)陰性對(duì)照；(9)內(nèi)切酶緩沖體系；(10)限制性內(nèi)切酶；(11)PCR用水；(12)10×電泳上樣緩沖液：0.25%溴酚蘭，40%(w/v)蔗糖水溶液。本發(fā)明通過提取生物樣品中的基因組DNA，經(jīng)過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性酶切片段多態(tài)性(PCR-RFLP)分析方法，檢測(cè)個(gè)體生物樣品中磺脲類受體基因的多態(tài)性情況，預(yù)測(cè)磺脲類藥物的療效。
制備
1.將苯酚紅溶于冰乙酸，攪拌下加入溴溶于冰乙酸的溶液，攪拌幾分鐘后傾入60℃熱水中，冷卻至室溫，放置過夜。過濾，依次用冰乙酸、苯洗滌濾餅，晾干，得溴酚藍(lán)。
2.將酚紅溶于冰乙酸中，加熱至沸，滴加溴溶于冰乙酸中的溶液，黃色固體析出時(shí)，過濾，用乙酸洗去游離溴，置于空氣中干燥后即得粗品。用冰乙酸或丙酮與冰乙酸混合溶劑重結(jié)晶，得純品溴酚藍(lán)。
3.將酚紅和溴分別溶于醋酸中，制成溶液。先將酚紅醋酸溶液加熱至沸，然后在攪拌下緩慢加入溴的醋酸溶液：當(dāng)酚紅反應(yīng)完全且黃色晶體不再析出后，冷卻，過濾。用少量醋酸洗去結(jié)晶中的游離溴后，用醋酸或丙酮醋酸進(jìn)行重結(jié)晶，在空氣中干燥得純品溴酚藍(lán)。
主要參參考資料
[1] 雞血紅蛋白與溴酚蘭之間的相互作用
[2] CN200510061995.3用于氫離子識(shí)別的光化學(xué)復(fù)合敏感膜的制備方法
[3] CN201810655552.4一種具備補(bǔ)鈣功能的復(fù)合蛋白粉及其制備方法
[4] CN200610002634.6預(yù)測(cè)磺脲類藥物療效的試劑盒