背景及概述^[1]

伊紅是由醌式苯環(huán)結(jié)構(gòu)的發(fā)色基團(tuán)和鹵素原子溴及鈉鹽的助色基團(tuán)所組成的酸性染料。伊紅是人工合成的化學(xué)試劑，外觀呈磚紅色或醬紅色結(jié)晶體。屬熒光酚酞衍生物類，具有綠黃色熒光。其共有4種類型，即伊紅Y、伊紅B、甲基伊紅及乙基伊紅。雖然4種類型伊紅化學(xué)作用有相似之處，但伊紅Y是與蘇木精配對(duì)最理想的對(duì)比染料。其在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，與蛋白質(zhì)的氨基正電荷(陽(yáng)離子)結(jié)合而使細(xì)胞質(zhì)染色，細(xì)胞質(zhì)、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色，與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對(duì)比。因此伊紅是最常用的胞質(zhì)染料之一。

HE染色效果除與組織是否新鮮、固定是否及時(shí)以及脫水包埋過(guò)程是否恰當(dāng)有關(guān)外，染色液的配置和使用也是重要的環(huán)節(jié)之一，染色液的質(zhì)量最終決定染色的效果。有實(shí)驗(yàn)使用伊紅染色劑均是伊紅Y（水溶），在長(zhǎng)期的工作實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，采用不同的伊紅配置法所得的染液，HE染色效果差異明顯。

配制法^[1]

伊紅Y（水溶）的配制主要有兩種：

1）傳統(tǒng)法：取伊紅1g，加雙蒸水100ml，用玻璃棒充分?jǐn)嚢枞芙夂?，靜置過(guò)夜，過(guò)濾后待用，在使用前加入冰醋酸0.1ml。

2）改良法：取伊紅1g，加入雙蒸水100ml，用玻璃棒充分?jǐn)嚢枞芙夂螅尤霛恹}酸2ml，充分?jǐn)嚢?，靜置過(guò)夜，過(guò)濾，沉淀物用雙蒸水沖洗2次，然后將沉淀物連同濾紙放入恒溫干燥箱內(nèi)充分干燥，濾液棄之不用。將已干燥的沉淀物置于燒杯中，加入95%乙200ml，攪拌溶解后待用，使用前用95%乙醇稀釋1倍，即再加入95%乙醇200ml。

主要參考資料

[1] 水溶性伊紅Y不同配置法對(duì)HE染色效果的影響