概述[1]
胎牛血清是妊娠后期剖腹取出的胎牛血清。胎牛血清營養(yǎng)成分完全而豐富,代謝產(chǎn)物極少,微生物感染的可能性最小,品質(zhì)最高,是組織細(xì)胞培養(yǎng)和病毒增殖時的重要營養(yǎng)來源。GIBCO胎牛血清是Gibco原裝進(jìn)口產(chǎn)品分裝而成,產(chǎn)地澳洲。GIBCO胎牛血清不僅適用于常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng),更適合用于一些要求較高的細(xì)胞的培養(yǎng)。GIBCO胎牛血清使用非常便捷,用于常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)時,溶解后直接倒入500ml的DMEM等細(xì)胞培養(yǎng)基中,混勻后即可使用。

Gibco是世界著名動物血清品牌,所有血源都是由美國農(nóng)業(yè)部和歐盟所認(rèn)證的無瘋牛病區(qū)域的屠宰場所提供。Gibco血清憑借其優(yōu)良的品質(zhì)、極高的可靠性和良好的技術(shù)支持,贏得廣大研究人員的信任。GIBCO胎牛血清從血液收集到最終產(chǎn)品檢驗(yàn)和審核的每一個步驟,都采用專用設(shè)備和標(biāo)準(zhǔn)操作程序,保證高品質(zhì)和各批次的一致性。所有操作符合GMP(GoodManufacturingPracticesforDrug)標(biāo)準(zhǔn)。
注意事項[2]
1)如果不能短期內(nèi)使用完畢,解凍后適當(dāng)分裝。血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此在分裝血清時須使分裝瓶預(yù)留一定體積空間,否則易導(dǎo)致分裝瓶凍裂而發(fā)生污染。
2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍的血清。加熱過程中需有規(guī)則地?fù)u晃均勻。熱處理的目的是滅活血清中的補(bǔ)體(complement)。除非必須,一般不推薦對血清進(jìn)行熱處理。因?yàn)闊崽幚頃斐裳宄恋砦镲@著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體參與的反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用、平滑肌細(xì)胞收縮、肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺、增強(qiáng)吞噬作用、促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化等。
3)瓶裝GIBCO胎牛血清解凍需采用緩慢解凍法:把在-15~-40℃低溫冰箱中保存的血清放入4℃冰箱中解凍約1天,待全部解凍后再分裝。在解凍過程中每隔約2小時可輕輕搖晃均勻(盡量避免產(chǎn)生氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃或更低溫度進(jìn)入37℃水浴解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀,從而使用血清的質(zhì)量下降。
4)GIBCO胎牛血清中的絮狀沉淀物主要是解凍后血清中纖維蛋白及4℃長時間保存后血清中的脂蛋白變性造成的,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量,可不用處理。如果必須要處理,可400g離心5分鐘去除。但不宜過濾去除,因?yàn)樾鯛钗锟赡茏枞麨V膜。
5)經(jīng)過熱處理的血清中沉淀物會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察像“小黑點(diǎn)”,而且由于這些“小黑點(diǎn)”的布朗運(yùn)動在顯微鏡下被放大,感覺是在游動,所以經(jīng)常被誤認(rèn)為血清被微生物污染。通常這些小黑點(diǎn)不會影響細(xì)胞生長,但如果懷疑血清存在微生物污染,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批次的血清??蓪⑦m量血清用培養(yǎng)液稀釋至10%濃度后培養(yǎng)1-3天,觀察小黑點(diǎn)是否急劇增多,或取適量血清在LB平板上涂板培養(yǎng)觀察是否產(chǎn)生菌落,以確定是否存在微生物污染。
6)請勿將南美胎牛血清在37℃放置過長時間,否則血清會逐漸變渾濁,同時血清中的有效成分也會逐漸失活而影響血清質(zhì)量。
主要參考資料
[1]農(nóng)業(yè)大詞典
[2] GIBCO胎牛血清使用說明