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beta-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二鈉鹽的有關物質(zhì)檢測

2020/6/19 11:17:17

背景及概述[1]

beta-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二鈉鹽通常都是由β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADP水解成鹽而得到。NADP是一種輔酶,是β-煙酸酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD與一個磷酸分子以酯鍵結合的物質(zhì),廣泛存在生物體內(nèi)能量代謝過程,嘌呤核苷酸是機體重要的能量物質(zhì)。β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸NAD和β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADP是細胞能量代謝所必需的輔酶,在能量代謝中起著核心作用。此外,嘌呤核苷酸在生物過程中也起著重要的傳遞作用,能量反應中的質(zhì)子通常先被傳遞至NAD和NADP,再還原成NADH和NADPH,經(jīng)過電子傳遞至氧并釋放能量。而生成的還原性NADH和NADPH是谷胱甘肽還原酶的輔酶,具有重要的抗氧化功能。

檢測[1]

一種β-NADP二鈉鹽含量及有關物質(zhì)的測定方法,所述有關物質(zhì)為NAD、ATP、ADP,其特征在于包括以下步驟:

A、取sigma對照品:beta-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二鈉鹽用稀釋劑溶解成濃度為1mg/ml的對照品溶液;取beta-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二鈉鹽樣品用稀釋劑溶解成濃度為0.5mg/ml的供試品溶液;

B、分別取對照品溶液和供試品溶液各20ul,注入液相色譜儀中,記錄色譜圖中beta-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二鈉鹽的峰面積,按照外標法,以無水beta-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二鈉鹽來計算HPLC含量,不小于98%;

C、分別取sigma對照品NAD、ATP、ADP用流動相分別溶解成濃度為5ug/ml、2.5ug/ml、2.5ug/ml的雜質(zhì)對照品溶液,取beta-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二鈉鹽樣品用流動相溶解成濃度為0.5mg/ml的樣品溶液;

D、分別取NAD、ATP、ADP的雜質(zhì)對照品溶液各20ul,注入液相色譜儀中,記錄色譜圖中NAD、ATP、ADP的峰面積,再按照外標法計算beta-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二鈉鹽樣品中NAD、ADP、ATP的含量,其中NAD、ADP、ATP分別各不超過1.0%、0.5%、0.5%。

參考文獻

[1] CN201610192347.X 一種β-NADP二鈉鹽含量及有關物質(zhì)的測定方法

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