背景[1-3]
U87MG人惡性膠質(zhì)母細胞瘤細胞是一種致病細胞，引發(fā)膠質(zhì)母細胞瘤，由Ponten J等建立，源于惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤。裸鼠皮下接種可成瘤。。
因腫瘤為高度惡性，生長快、病程短，自出現(xiàn)癥狀到就診時多數(shù)在3個月之內(nèi)，約70%-80%在半年以內(nèi)。個別病例因腫瘤出血，可呈卒中樣發(fā)病。偶爾可見病程較長者，可能腫瘤早期較為良性，隨腫瘤生長而發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化有關(guān)。由于腫瘤生長迅速，腦水腫廣泛，顱內(nèi)壓增高癥狀明顯，幾乎全部病人都有頭痛、嘔吐、視神經(jīng)乳頭水腫。約33%的病人有癲癇發(fā)作。約20%的病人表現(xiàn)淡漠、癡呆、智力減退等精神癥狀。腫瘤浸潤性破壞腦組織，造成一系列的局灶癥狀，病人有不同程度的偏癱、偏身感覺陳礙、失語和偏盲等。病人可因腫瘤出血而出現(xiàn)腦膜刺激癥狀，而癲癇的發(fā)生率較星形細胞瘤和少技膠質(zhì)細胞瘤少見。
膠質(zhì)母細胞瘤是星形細胞腫瘤中惡性程度最高的膠質(zhì)瘤。腫瘤位于皮質(zhì)下，多數(shù)生長于幕上大腦半球各處。呈浸潤性生長，常侵犯幾個腦葉，并侵犯深部結(jié)構(gòu)，還可經(jīng)胼胝體波及對側(cè)大腦半球。發(fā)生部位以額葉最多見。它的增殖能力非常強，發(fā)病部位不同，患者的癥狀也不一樣；膠質(zhì)母細胞瘤的治療包括手術(shù)切除、放療、化療及其他綜合治療，首選手術(shù)切除。
應(yīng)用[4][5]
用于PRDX-1在人膠質(zhì)瘤惡性進展中的作用及分子機制的初步研究
膠質(zhì)瘤是人常見的顱內(nèi)惡性腫瘤，傳統(tǒng)的手術(shù)及放化療效果不顯著。之前在諾帝(Nordy)誘導(dǎo)人惡性膠質(zhì)瘤細胞U87MG分化的研究中發(fā)現(xiàn)瘤細胞在誘導(dǎo)分化后增殖活性明顯降低，且PRDX-1蛋白(Peroxiredoxin1，過氧化物氧化還原蛋白1表達顯著減少，故推測PRDX-1可能與膠質(zhì)瘤的惡性進展密切相關(guān)。
通過檢測PRDX-1及其可能影響的分子通路的主要蛋白PTEN，EGFR，PI3K，Nrf2，NF-κB，TNF-α在人膠質(zhì)瘤組織中的表達水平并分析其與膠質(zhì)瘤惡性程度的相關(guān)性，同時構(gòu)建過表達及抑制PRDX-1表達的慢病毒載體并轉(zhuǎn)染入人惡性膠質(zhì)瘤細胞U87MG中，觀測其生物學(xué)特征改變，探索PRDX-1在膠質(zhì)瘤演變過程中的作用及可能的分子機制。
構(gòu)建3組針對人PRDX-1基因的shRNA慢病毒表達載體，將其轉(zhuǎn)染至人惡性膠質(zhì)瘤細胞U87MG，篩選并建立穩(wěn)定感染細胞系，Western blot、RT-PCR檢測轉(zhuǎn)染效率，并選擇抑制效率最高的細胞株檢測轉(zhuǎn)染前后U87MG細胞凋亡水平，集落形成能力，繪制生長曲線，免疫細胞化學(xué)染色檢測PRDX-1，PTEN，EGFR，PI3K，Nrf2，NF-κB，TNF-α在轉(zhuǎn)染前后表達水平有無顯著變化。
構(gòu)建針對人PRDX-1基因的過表達慢病毒載體，并轉(zhuǎn)染至人惡性膠質(zhì)瘤細胞U87MG，篩選并建立穩(wěn)定感染細胞系，Western blot、RT-PCR檢測轉(zhuǎn)染效率，同時檢測轉(zhuǎn)染前后U87MG細胞凋亡水平，集落形成能力，繪制生長曲線，免疫細胞化學(xué)檢測PRDX-1，PTEN，EGFR，PI3K，Nrf2，NF-κB，TNF-α在轉(zhuǎn)染前后表達水平有無顯著變化。
參考文獻
[1]Role of Peroxiredoxin I in Rectal Cancer and Related to p53 Status[J].Miao-Fen Chen,Kuan-Der Lee,Chung-Hung Yeh,Wen-Cheng Chen,Wen-Shih Huang,Chih-Chien Chin,Paul-Yang Lin,Jeng-Yi Wang.International Journal of Radiation Oncology,Biology,Physics.2010(3)
[2]PTEN inhibits the migration and invasion of HepG2 cells by coordinatelydecreasing MMP expression via the PI3K/Akt pathway[J].Tao Tian,Ke-Jun Nan,Hui Guo,Wen-Juan Wang,Zhi-Ping Ruan,Shu-Hong Wang,Xuan Liang,Chuang-Xin Lu.Oncology Reports.2010(6)
[3]Reactive oxygen species(ROS)in multistage carcinogenesis[J].Mihalis Panayiotidis.Cancer Letters.2008(1)
[4]Transgenic Xenopus with prx1 limb enhancer reveals crucial contribution of MEK/ERK and PI3K/AKT pathways in blastema formation during limb regeneration[J].Makoto Suzuki,Akira Satoh,Hiroyuki Ide,Koji Tamura.Developmental Biology.2007(2)
[5]劉金戈.PRDX-1在人膠質(zhì)瘤惡性進展中的作用及分子機制的初步研究[D].第三軍醫(yī)大學(xué),2014.