背景[1-3]
人尿蛋白(UP)ELISA KIT應用雙抗體夾心法測定標本中人尿蛋白(UP)水平。用純化的人尿蛋白(UP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入人尿蛋白(UP)，再與HRP標記的人尿蛋白(UP)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人尿蛋白(UP)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人尿蛋白(UP)濃度。尿內出現(xiàn)蛋白稱為蛋白尿，也即尿蛋白。正常尿液中含少量小分子蛋白，普通尿常規(guī)檢查測不出，當尿中蛋白增加，尿常規(guī)檢查可以測出即為蛋白尿。蛋白尿是腎臟病的常見表現(xiàn)，全身性疾病亦可出現(xiàn)蛋白尿。
尿蛋白偏高是指尿液中的蛋白質含量偏高，蛋白質漏進尿液從尿道排出來形成了蛋白尿。尿蛋白越高說明腎臟濾過功能越差，這是衡量腎臟功能的重要指標。正常情況下，人體尿液里不含蛋白質或只含有微量蛋白質，但當腎臟發(fā)生病變時，隨血液循環(huán)流動的蛋白質流經腎臟時，因為腎臟濾過功能的降低而使蛋白質“漏網”。尿蛋白偏高的原因考慮最多的應該是腎病，因為腎病最容易導致尿蛋白。正常的情況下，蛋白都會回吸收的，如果腎臟出現(xiàn)損傷的情況下，根據(jù)腎臟纖維化發(fā)展原則即腎臟纖維化開始啟動，腎臟出現(xiàn)回吸收的功能下降，就會漏出一些蛋白，從而導致尿蛋白的產生，出現(xiàn)尿蛋白偏高。
應用[4][5]
人尿蛋白(UP)ELISA KIT用于紫癜性腎炎患兒血清及尿液中骨膜蛋白表達水平及意義研究。
骨膜蛋白(periostin)與紫癜性腎炎(Henoch-Schonlein purpura nephritis,HSPN)之間的關系,以及血清、尿液中骨膜蛋白與肌酐、尿素、胱抑素C、24h尿蛋白定量、人尿微量白蛋白的相關性,采用ROC曲線評價血清、尿液中骨膜蛋白在紫癜性腎炎中價值,探討血清及尿骨膜蛋白與紫癜性腎炎發(fā)生之間的關系。采用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)測定研究對象血清及尿液中骨膜蛋白的水平。分別比較HSPN組、HSP組和正常對照組血清及尿骨膜蛋白的表達水平,并比較血清及尿骨膜蛋白與臨床常用指標的相關性,采用ROC曲線評價骨膜蛋白對紫癜性腎炎的價值。
結果:1.HSPN組、HSP組、正常對照組血清骨膜蛋白平均濃度分別為(50.02±8.88)pg/ml,(41.68±8.26)pg/ml,(36.99±8.34)pg/ml,三組間差異具有統(tǒng)計學意義(F=18.081,P<0.001),兩兩之間比較:HSPN組與正常對照組、HSP組與正常對照組、HSPN組與HSP組比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.001、P<0.001、P<0.05)。2.HSPN組、HSP組、正常對照組尿骨膜蛋白平均濃度分別為(34.94±3.04)pg/ml,(31.75±1.91)pg/ml,(31.00±1.99)pg/ml。尿骨膜蛋白水平在三組間差異具有統(tǒng)計學意義(F=23.405,P<0.001),兩兩之間比較:HSPN組與正常對照組、HSPN組與HSP組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.001、P<0.001),HSP組與正常對照組相比,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。3.HSPN組尿骨膜蛋白與24小時尿蛋白定量(r=0.810,P<0.001)、人尿微量白蛋白呈正相關(r=0.735,P<0.001),與尿素、肌酐、尿酸、胱抑素C無相關性;HSPN組血清骨膜蛋白與人尿微量白蛋白呈正相關(r=0.396,P=0.030),與24小時尿蛋白定量、尿素、肌酐、尿酸、胱抑素C均無相關性。
參考文獻
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