簡介^[1]

IC50 (half maximal inhibitory concentration)是指被測量的拮抗劑的半抑制濃度。它能指示某一藥物或者物質(zhì)(抑制劑)在抑制某些生物程序(或者是包含在此程序中的某些物質(zhì)，比如酶，細胞受體或是微生物)的半量。在凋亡方面，可以理解為一定濃度的某種藥物誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡50%，該濃度稱為50%抑制濃度，即凋亡細胞與全部細胞數(shù)之比等于50%時所對應(yīng)的濃度，IC50值可以用來衡量藥物誘導(dǎo)凋亡的能力，即誘導(dǎo)能力越強，該數(shù)值越低，當(dāng)然也可以反向說明某種細胞對藥物的耐受程度。

利用噻唑蘭(MTT)，透過細胞膜進入細胞內(nèi)，活細胞線粒體中的琥珀脫氫酶能使外源性MTT還原為難溶于水的藍紫色的甲臜（Formazan）結(jié)晶并沉積在細胞中，結(jié)晶物能被二甲基亞砜（DMSO）溶解，用酶聯(lián)免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值，可間接反映細胞數(shù)量。

檢測步驟^[1]

1、細胞接種：收到客戶細胞后，我們會用細胞計數(shù)板計數(shù)細胞，得出細胞懸液濃度。計算出應(yīng)稀釋倍數(shù)，按MTT試劑盒要求在96孔板內(nèi)接種相應(yīng)濃度的細胞懸液；

2、細胞培養(yǎng)：然后在無菌恒溫細胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)接種好的96孔細胞培養(yǎng)板，并實時觀察細胞狀態(tài)； 

3、藥物處理并呈色：按不同濃度梯度加入藥物作用細胞；

4、溶解，比色：加入MTT檢測試劑，按操作要求孵育相應(yīng)時間，在酶標(biāo)儀內(nèi)檢測對照組和實驗組的吸光值。并處理數(shù)據(jù)得出IC50結(jié)果。

主要參考文獻

[1] 趙斌 葛金芳 黃曉暉 李俊；小議在MTT法測細胞增殖抑制率中IC50的計算方法。第十一屆全國數(shù)學(xué)藥理學(xué)學(xué)術(shù)會議