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流式細胞分選的說明

2020/7/16 8:57:06

背景[1]

隨著細胞治療和基因治療技術(shù)的不斷發(fā)展,細胞的相關(guān)研究已經(jīng)逐漸成為當前醫(yī)學(xué)乃至整個生命科學(xué)領(lǐng)域中的研究熱點,細胞培養(yǎng)已經(jīng)成為科研中一個很重要的技術(shù),而要獲得較純的目的細胞,流式細胞分選、純化已成為關(guān)鍵的問題。

簡介[1]

流式細胞分選是把一種細胞從多細胞樣品中分離出來。用抗體標記細胞,同時被用的抗體被螢光標記或連接免疫磁珠或其它,利用螢光和免疫磁珠的特性來分離細胞。

細胞的分選是通過分離含有單細胞的液滴而實現(xiàn)的。在流動室的噴口.上配有一個超高頻電晶體,充電后振動,使噴出的液流斷裂為均勻的液滴,待測定細胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正負不同的電荷,當液滴流經(jīng)帶有幾千伏特的偏轉(zhuǎn)板時,在高壓電場的作用下偏轉(zhuǎn),落入各自的收集容器中,不予充電的液滴落入中間的廢液容器,從而實現(xiàn)細胞的分離。

應(yīng)用[1]

1、利用流式細胞分選技術(shù)分選腫瘤干細胞

腫瘤干細胞是腫瘤中具有自我更新.無限增殖及多向分化潛能的細胞,這部分細胞雖然只占少部分,但在腫瘤的發(fā)生.演進、復(fù)發(fā)耐藥及逃逸免疫系統(tǒng)的識別和清除過程中可能發(fā)揮了至關(guān)重要的作用。

2、利用流式細胞分選技術(shù)分選外周血細胞

基于流式細胞儀的分選功能,根據(jù)細胞的大小以及顆粒度等特征,對白細胞直接進行分選獲取人外周血中的單核細胞的方法,既避免了多次重復(fù)離心,又能分選得到純度在80%-90%之間的單核細胞用于后續(xù)實驗,為深人研究單核細胞提供了良好的技術(shù)平臺。

3、利用流式細胞分選技術(shù)分選染色體

通過流式分選的方法得到高質(zhì)量的單個染色體,該方法可同時純化大量染色體,為后續(xù)試驗,如植物基因組測序等提供了方便。

4、利用流式細胞分選技術(shù)分選造血干細胞

通過配制HSCs體外培養(yǎng)液并結(jié)合流式細胞分選技術(shù),建立了一種在體外不需要基質(zhì)細胞支持的,穩(wěn)定的,高通量培養(yǎng)單個HSC形成-個血細胞集落的實驗方法。

5、利用流式細胞分選技術(shù)分選神經(jīng)細胞

建立了一種較為完善的流式細胞儀分選在體模型中神經(jīng)細胞的技術(shù)方法,該分選方法可以同時獲得純度高、數(shù)量多的不同種類的神經(jīng)細胞。

主要參考文獻

[1] 陳少堅 郭風勁;流式細胞分選技術(shù)應(yīng)用的研究進展?!吨腥A實驗外科雜志》 2011年 第9期。

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