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脂肪?;o酶A還原酶1抗體的應(yīng)用

2020/7/24 9:11:43

背景[1-3]

脂肪?;o酶A還原酶1抗體是可以特異性結(jié)合脂肪?;o酶A還原酶1的一類多克隆抗體,主要用于檢測脂肪?;o酶A還原酶1的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。

脂肪酰基輔酶A還原酶2屬于脂肪?;o酶A還原酶家族。主要表達(dá)在眼瞼的瞼板腺和皮膚的皮脂腺。大腦中也有表達(dá)并合成了大量的醚脂。其生物學(xué)功能包括脂質(zhì)代謝過程,長鏈脂肪?;o酶A代謝過程以及蠟酯生物合成過程等。脂肪?;o酶A還原酶2參與蠟酯生物合成的步的還原酶蛋白編碼,利用C16或C18飽和脂肪酸作為底物,將脂肪酸轉(zhuǎn)化為脂肪醇。

?;o酶A acyl-CoA為脂肪酸與輔酶A的硫醇脂化合物(RCO-CoA)。系脂肪酸合成和分解的活性代謝中間物,水解時生成脂肪酸和輔酶A。另外在脂肪酸和輔酶A合成時消耗ATP。

?;o酶A acyl-CoA在合成中與脂肪酸的鏈長有關(guān),至少有三種特異性不同的酶(乙酰-CoA合成酶,EC6.2.1.1.。丁酰-CoA合成酶,EC6.2.1.2作用于C4-Cll。?;?CoA合成酶,EC6.2.1.3作用于C6-C20)參與。

HMG-CoA還原酶,即3-羥基-3-甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(3-hydroxy-3-methyl glutaryl coenzyme A reductase,HMGR,EC:1.1.1.34)。

HMGR催化依賴于NADPH的從3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A到甲羥戊酸(MVA)的合成反應(yīng),由于甲羥戊酸的生成是一個不可逆過程,因此,HMGR被認(rèn)為是MVA途徑中的個限速酶,是細(xì)胞質(zhì)萜類化合物的代謝中的重要調(diào)控點(diǎn)。HMG-CoA還原酶:肝細(xì)胞合成膽固醇過程中的限速酶,催化生成甲羥戊酸,抑制HMG-CoA還原酶能阻礙膽固醇合成。

應(yīng)用[4][5]

用于白蠟蟲脂酰輔酶A還原酶基因(EpFAR)的克隆表達(dá)與功能研究

白蠟蟲(Ericerus pela Chavanness)是我國特有的一種資源昆蟲,由于它能分泌性質(zhì)優(yōu)異的蟲白蠟,在中國已經(jīng)被人工養(yǎng)殖上千年,蟲蠟主要用于蠟染、蠟燭、刻板模印、中藥等行業(yè)。蟲白蠟是以高級飽和一元酸和高級飽和一元醇所構(gòu)成的酯類為主要成分。?;€原途徑是生物體內(nèi)蠟酯合成的主要途徑之一,即脂酰輔酶A(fatty acyl-CoA)在脂酰輔酶A還原酶(fatty acyl-CoAreductase,FAR)的作用下還原生成脂肪醇,脂肪醇和脂酰輔酶A在蠟酯合酶(wax synthase,WS)的作用下生成酯。前期研究表明白蠟蟲fatty acyl-CoA reductase(EpFAR)基因是與泌蠟密切相關(guān)的基因之一。

白蠟蟲EpFAR基因轉(zhuǎn)錄水平與蛋白表達(dá)譜、亞細(xì)胞定位以實(shí)時定量PCR技術(shù)進(jìn)行的表達(dá)量測定結(jié)果顯示,在雄性白蠟蟲二齡泌蠟高峰期,基因EpFAR的轉(zhuǎn)錄主要在白蠟蟲的表皮組織中發(fā)生,而在脂肪體、馬氏管、消化道以及精巢中的mRNA轉(zhuǎn)錄水平相對低,在消化道中的轉(zhuǎn)錄水平最低,表皮中的轉(zhuǎn)錄水平與其他組織中的轉(zhuǎn)錄水平差異顯著,提示EpFAR轉(zhuǎn)錄的發(fā)生可能與表皮中蠟腺的生理代謝相關(guān)。以免疫熒光技術(shù)測定EpFAR蛋白的表達(dá)譜,結(jié)果顯示,在雄性白蠟蟲二齡泌蠟高峰期,EpFAR蛋白主要在白蠟蟲表皮蠟腺和精巢中表達(dá),在其他組織部位檢測不到紅色熒光,提示該蛋白的表達(dá)可能與蠟腺和精巢的生理代謝相關(guān),或者受到特定基因的調(diào)控。

參考文獻(xiàn)

[1]Identification and characterization of a fatty acyl reductase from a S podoptera littoralis female gland involved in pheromone biosynthesis[J].G.Carot‐Sans,L.Mu?oz,M.D.Piulachs,A.Guerrero,G.Rosell.Insect Mol Biol.2015(1)

[2]The fatty acyl-CoA reductase Waterproof mediates airway clearance in Drosophila[J].Martin H.J.Jaspers,Ralf Pflanz,Dietmar Riedel,Steffen Kawelke,Ivo Feussner,Reinhard Schuh.Developmental Biology.2014(1)

[3]Within-population variability in a moth sex pheromone blend:genetic basis and behavioural consequences[J].Astrid T.Groot,Gerhard Sch?fl,Ollie Inglis,Susanne Donnerhacke,Alice Classen,Antje Schmalz,Richard G.Santangelo,Jennifer Emerson,Fred Gould,Coby Schal,David G.Heckel.Proceedings of the Royal Society B:Biological Sciences.2014(1779)

[4]Tissue‐specific expression of the pheromone gland‐specific fatty acyl reductase gene in O strinia scapulalis[J].Binu Antony,Yukio Ishikawa.Entomol Exp Appl.2013(1)

[5]胡艷紅.白蠟蟲脂酰輔酶A還原酶基因(EpFAR)的克隆表達(dá)與功能研究[D].南京林業(yè)大學(xué),2018.

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