背景[1-3]
倉鼠抗小鼠CD28采用雜交瘤單克隆抗體技術(shù)制備，抗體類別為IgG。本品經(jīng)純化溶于PBS(pH7.4，含NaN3)，可用于小鼠CD28細(xì)胞的檢測分析與功能研究。本品可用于流式細(xì)胞分析，免疫組化，IP和功能分析等實驗。
CD28是T淋巴細(xì)胞表面表達(dá)的共刺激分子，對T細(xì)胞的活化起到重要作用。它與APC（抗原遞呈細(xì)胞）上的B7分子結(jié)合，介導(dǎo)T細(xì)胞的共刺激并促進(jìn)其存活、增殖以及產(chǎn)生細(xì)胞因子。
對于Tc和Th細(xì)胞來說，共刺激信號傳導(dǎo)降低了T細(xì)胞活化的閾值，促進(jìn)了T細(xì)胞的增殖和分化。在沒有CD28共刺激存在時，初始T細(xì)胞不會被活化，也不會發(fā)生應(yīng)答。
CD28參與的共刺激有多方面重要的分子效應(yīng)：1.誘導(dǎo)T細(xì)胞表面IL-2R（白介素-2受體）的表達(dá)，從而允許細(xì)胞接收第三信號；2.使Th細(xì)胞開始分泌大量的細(xì)胞因子和趨化因子；3.誘導(dǎo)表達(dá)和上調(diào)表達(dá)在Th和Tc細(xì)胞內(nèi)其他共刺激和調(diào)節(jié)分子.
小鼠CD28也稱Tp44,T44，是一種分子量約44kD的Ⅰ型跨膜糖蛋白，屬Ig超家族成員，主要在小鼠胸腺細(xì)胞，外周血T淋巴細(xì)胞，NK細(xì)胞上表達(dá)。CD28與CD80(B7-1)和CD86(B7-2)結(jié)合作為第二信號參與T細(xì)胞與NK細(xì)胞的活化與增殖。有研究報道，CD28與其抗體結(jié)合可促進(jìn)T細(xì)胞的增殖和細(xì)胞因子的分泌，促進(jìn)CTL細(xì)胞的發(fā)育。
應(yīng)用[4][5]
用于HBV轉(zhuǎn)基因小鼠肝臟NKT細(xì)胞功能與PD1、CD28表達(dá)分析研究
研究HBV轉(zhuǎn)基因小鼠肝臟中NKT細(xì)胞的功能與表面PD1、CD28表達(dá)的關(guān)系。方法分離小鼠肝臟、脾臟、胸腺和腹膜淋巴結(jié)單個核細(xì)胞,利用流式細(xì)胞檢測技術(shù),分別檢測其淋巴細(xì)胞中NKT細(xì)胞的頻率,同時檢測肝臟NKT細(xì)胞PD1、CD28的表達(dá)及IFN-γ、IL-4的分泌功能,比較肝臟、脾臟、胸腺和腹膜淋巴結(jié)這幾個主要免疫組織淋巴細(xì)胞中NKT細(xì)胞所占的比例,并分析肝臟NKT細(xì)胞PD1、CD28的表達(dá)與細(xì)胞功能的關(guān)系。
結(jié)果與正常同品系小鼠比較,HBV轉(zhuǎn)基因小鼠肝臟、脾臟、胸腺和腹膜淋巴結(jié)NKT細(xì)胞數(shù)量明顯減少(P<0.05),與脾臟、胸腺和腹膜淋巴結(jié)相比,肝臟淋巴細(xì)胞中含有大量的NKT細(xì)胞;與正常同品系小鼠比較,HBV轉(zhuǎn)基因小鼠肝臟NKT細(xì)胞PD1的表達(dá)明顯增多(P<0.05),CD28的表達(dá)明顯減少(P<0.05),肝臟NKT細(xì)胞IFN-γ、IL-4的分泌功能明顯降低(P<0.05)。
結(jié)論肝臟中含有大量的NKT細(xì)胞,HBV轉(zhuǎn)基因小鼠肝臟NKT細(xì)胞的功能存在明顯的缺陷,并提示PD1的增加和CD28的降低可能與NKT細(xì)胞功能的下調(diào)密切相關(guān)。
參考文獻(xiàn)
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[3]Severe functionalimpairment and elevated PD-1 expression in CD1d-restrictedNKTcells retained duringchronic HIV-1 infection.Moll M,Kuylenstierna C,GonzalezVD,et al.European Journal of Immunology.2009
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[5]汪曉鳳,鄧紅麗,張建明,雷宇,陳敏,石統(tǒng)東.HBV轉(zhuǎn)基因小鼠肝臟NKT細(xì)胞功能與PD1、CD28表達(dá)分析[J].免疫學(xué)雜志,2012,28(04):277-281.