背景[1-3]
阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基(DFI瓊脂)是用于阪崎腸桿菌的分離培養(yǎng)，阪崎腸桿菌顯藍-綠色菌落，其它菌顯無色或黃色。
用法：稱取本品8.62g加入200ml蒸餾水，加熱煮沸完全溶解，121℃高壓滅菌15min，冷至50℃左右時，傾入無菌平皿。
操作步驟：
⒈取瓶內(nèi)干粉39.6克，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌15min；冷卻至50℃，搖勻倒平板。在室溫可保存一天或在冰箱里貯存數(shù)天（避光，4℃）。
⒉取樣品333.0克按MPN三管法分別取100.0克、10.0克和1.0克分裝在各三個2000.0ml、250.0ml和100.0ml的三角瓶中，在三角瓶中已裝有經(jīng)45℃預熱的9/10（樣品為1/10）的無菌蒸餾水，搖勻，在36℃培養(yǎng)18～22小時（SN和FDA方法）。
⒊各取10.0ml上述懸浮液加到裝有90.0mlEE肉湯（022160）的150.0ml的三角瓶中，在36℃增菌培養(yǎng)18～22小時。
⒋用劃線或涂布法把混勻的EE肉湯接種到阪崎腸桿菌顯色瓊脂平板上，35～37℃培養(yǎng)18～24小時。
⒌可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管試驗，對疑似阪崎腸桿菌菌落進行生化鑒定。
阪崎腸桿菌（又稱阪崎氏腸桿菌）是腸桿菌科的一種，1980年由黃色陰溝腸桿菌更名為阪崎腸桿菌。阪崎腸桿菌能引起嚴重的新生兒腦膜炎、小腸結腸炎和菌血癥，死亡率高達50%以上。目前，微生物學家尚不清楚阪崎腸桿菌的污染來源，但許多病例報告表明嬰兒配方粉是目前發(fā)現(xiàn)的主要感染渠道。
應用[4][5]
用于乳制品中阪崎腸桿菌的暴露研究
以奶粉、巴殺乳、UHT乳和發(fā)酵乳四種主要乳制品作為研究對象,利用概率論統(tǒng)計的方法研究乳制品加工過程中阪崎腸桿菌的分布情況,對乳制品生產(chǎn)過程各個關鍵控制點中阪崎腸桿菌的污染情況進行研究統(tǒng)計,對于保障奶粉安全和指導奶粉生產(chǎn)具有重要意義；通過阪崎腸桿菌污染乳制品模擬試驗,研究其在乳制品貨架期期間的生長趨勢和存活情況,對于乳制品的安全貯存及科學喂養(yǎng)具有一定的理論指導意義。
研究結果如下：1、通過對奶粉加工過程關鍵控制點阪崎腸桿菌污染情況的研究,得出了濃縮后、噴霧干燥后、流化床后和成品中阪崎腸桿菌的污染率分別為0%、9.38%、3.13%和7.81%。
2、通過對巴氏殺菌乳加工過程中關鍵控制點阪崎腸桿菌污染情況的研究,得出了投產(chǎn)前生乳、配料后、巴氏殺菌(88-94℃,300s)后、灌裝后成品中阪崎腸桿菌的污染率分別為41.94%、25.81%、0%和3.23%。
3、通過對UHT乳加工過程關鍵控制點阪崎腸桿菌污染情況的研究,得出了投產(chǎn)前生乳、配料后、巴氏殺菌(88-94℃,15s)后、灌裝后成品中阪崎腸桿菌的污染率分別為50.00%、40.00%、3.33%和0%。
4、通過對發(fā)酵乳加工過程關鍵控制點阪崎腸桿菌污染情況的研究,得出了投產(chǎn)前生乳、配料后、巴氏殺菌(88-94℃,300s)后、灌裝后成品中阪崎腸桿菌的污染率分別為23.33%、16.67%、3.33%和3.33%。
5、通過奶粉粉貨架期中阪崎腸桿菌污染模擬試驗,得出了37℃下貯存第0月、第1月、第2月和第3月阪崎腸桿菌含量分別為2.3cfu/100g、0.92cfu/100g、0.36cfu/100g和小于0.3cfu/100g。
6、通過巴氏殺菌乳原輔材料阪崎腸桿菌污染模擬試驗,證明了巴氏殺菌(88-94℃,300s)能完全殺滅巴氏殺菌乳中不同濃度的阪崎腸桿菌。
參考文獻
[1]Efficacy of selected probiotic cultures to inhibit Enterobacter sakazakii ATCC 12868 in model reconstituted dairy products[J].Makuba A.Lihono,Aubrey F.Mendonca,Bledar Bisha,La Tanya Bankston,Terri D.Boylston.Int.J.of Food Safety,Nutrition and Public Heal.2011(2/3/)
[2]Distribution,prevalence and persistence of Cronobacter(Enterobacter sakazakii)in the nonprocessing and processing environments of five milk powder factories[J].H.M.Craven,C.M.McAuley,L.L.Duffy,N.Fegan.Journal of Applied Microbiology.2010(3)
[3]Inactivation of Cronobacter spp.(Enterobacter sakazakii)in infant formula using lactic acid,copper sulfate and monolaurin[J].M.A.Al‐Holy,L.F.Castro,H.M.Al‐Qadiri.Letters in Applied Microbiology.2010(3)
[4]Isolation of Enterobacter sakazakii and other Enterobacteriaceae from powdered infant formula milk and related products[J].Carol Iversen,Stephen Forsythe.Food Microbiology.2004(6)
[5]覃小玲.乳制品中阪崎腸桿菌的暴露研究[D].中南林業(yè)科技大學,2012.