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阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基(DFI瓊脂)的應(yīng)用

2020/10/14 9:08:54

背景[1-3]

阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基(DFI瓊脂)是用于阪崎腸桿菌的分離培養(yǎng),阪崎腸桿菌顯藍(lán)-綠色菌落,其它菌顯無色或黃色。

用法:稱取本品8.62g加入200ml蒸餾水,加熱煮沸完全溶解,121℃高壓滅菌15min,冷至50℃左右時(shí),傾入無菌平皿。

操作步驟:

⒈取瓶?jī)?nèi)干粉39.6克,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min;冷卻至50℃,搖勻倒平板。在室溫可保存一天或在冰箱里貯存數(shù)天(避光,4℃)。

⒉取樣品333.0克按MPN三管法分別取100.0克、10.0克和1.0克分裝在各三個(gè)2000.0ml、250.0ml和100.0ml的三角瓶中,在三角瓶中已裝有經(jīng)45℃預(yù)熱的9/10(樣品為1/10)的無菌蒸餾水,搖勻,在36℃培養(yǎng)18~22小時(shí)(SN和FDA方法)。

⒊各取10.0ml上述懸浮液加到裝有90.0mlEE肉湯(022160)的150.0ml的三角瓶中,在36℃增菌培養(yǎng)18~22小時(shí)。

⒋用劃線或涂布法把混勻的EE肉湯接種到阪崎腸桿菌顯色瓊脂平板上,35~37℃培養(yǎng)18~24小時(shí)。

⒌可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管試驗(yàn),對(duì)疑似阪崎腸桿菌菌落進(jìn)行生化鑒定。

阪崎腸桿菌(又稱阪崎氏腸桿菌)是腸桿菌科的一種,1980年由黃色陰溝腸桿菌更名為阪崎腸桿菌。阪崎腸桿菌能引起嚴(yán)重的新生兒腦膜炎、小腸結(jié)腸炎和菌血癥,死亡率高達(dá)50%以上。目前,微生物學(xué)家尚不清楚阪崎腸桿菌的污染來源,但許多病例報(bào)告表明嬰兒配方粉是目前發(fā)現(xiàn)的主要感染渠道。

應(yīng)用[4][5]

用于乳制品中阪崎腸桿菌的暴露研究

以奶粉、巴殺乳、UHT乳和發(fā)酵乳四種主要乳制品作為研究對(duì)象,利用概率論統(tǒng)計(jì)的方法研究乳制品加工過程中阪崎腸桿菌的分布情況,對(duì)乳制品生產(chǎn)過程各個(gè)關(guān)鍵控制點(diǎn)中阪崎腸桿菌的污染情況進(jìn)行研究統(tǒng)計(jì),對(duì)于保障奶粉安全和指導(dǎo)奶粉生產(chǎn)具有重要意義;通過阪崎腸桿菌污染乳制品模擬試驗(yàn),研究其在乳制品貨架期期間的生長(zhǎng)趨勢(shì)和存活情況,對(duì)于乳制品的安全貯存及科學(xué)喂養(yǎng)具有一定的理論指導(dǎo)意義。

研究結(jié)果如下:1、通過對(duì)奶粉加工過程關(guān)鍵控制點(diǎn)阪崎腸桿菌污染情況的研究,得出了濃縮后、噴霧干燥后、流化床后和成品中阪崎腸桿菌的污染率分別為0%、9.38%、3.13%和7.81%。

2、通過對(duì)巴氏殺菌乳加工過程中關(guān)鍵控制點(diǎn)阪崎腸桿菌污染情況的研究,得出了投產(chǎn)前生乳、配料后、巴氏殺菌(88-94℃,300s)后、灌裝后成品中阪崎腸桿菌的污染率分別為41.94%、25.81%、0%和3.23%。

3、通過對(duì)UHT乳加工過程關(guān)鍵控制點(diǎn)阪崎腸桿菌污染情況的研究,得出了投產(chǎn)前生乳、配料后、巴氏殺菌(88-94℃,15s)后、灌裝后成品中阪崎腸桿菌的污染率分別為50.00%、40.00%、3.33%和0%。

4、通過對(duì)發(fā)酵乳加工過程關(guān)鍵控制點(diǎn)阪崎腸桿菌污染情況的研究,得出了投產(chǎn)前生乳、配料后、巴氏殺菌(88-94℃,300s)后、灌裝后成品中阪崎腸桿菌的污染率分別為23.33%、16.67%、3.33%和3.33%。

5、通過奶粉粉貨架期中阪崎腸桿菌污染模擬試驗(yàn),得出了37℃下貯存第0月、第1月、第2月和第3月阪崎腸桿菌含量分別為2.3cfu/100g、0.92cfu/100g、0.36cfu/100g和小于0.3cfu/100g。

6、通過巴氏殺菌乳原輔材料阪崎腸桿菌污染模擬試驗(yàn),證明了巴氏殺菌(88-94℃,300s)能完全殺滅巴氏殺菌乳中不同濃度的阪崎腸桿菌。

參考文獻(xiàn)

[1]Efficacy of selected probiotic cultures to inhibit Enterobacter sakazakii ATCC 12868 in model reconstituted dairy products[J].Makuba A.Lihono,Aubrey F.Mendonca,Bledar Bisha,La Tanya Bankston,Terri D.Boylston.Int.J.of Food Safety,Nutrition and Public Heal.2011(2/3/)

[2]Distribution,prevalence and persistence of Cronobacter(Enterobacter sakazakii)in the nonprocessing and processing environments of five milk powder factories[J].H.M.Craven,C.M.McAuley,L.L.Duffy,N.Fegan.Journal of Applied Microbiology.2010(3)

[3]Inactivation of Cronobacter spp.(Enterobacter sakazakii)in infant formula using lactic acid,copper sulfate and monolaurin[J].M.A.Al‐Holy,L.F.Castro,H.M.Al‐Qadiri.Letters in Applied Microbiology.2010(3)

[4]Isolation of Enterobacter sakazakii and other Enterobacteriaceae from powdered infant formula milk and related products[J].Carol Iversen,Stephen Forsythe.Food Microbiology.2004(6)

[5]覃小玲.乳制品中阪崎腸桿菌的暴露研究[D].中南林業(yè)科技大學(xué),2012.

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