背景及概述[1]
培養(yǎng)基是為適合生物生長所需要的人工配制的混合物質(zhì)養(yǎng)料,常指培養(yǎng)微生物或生物細(xì)胞組織的養(yǎng)料,主要用于微生物的分離、培養(yǎng)、鑒定、保藏和釀造、發(fā)酵等方面。具體成分根據(jù)生物營養(yǎng)需要而不同。一般含有水、碳水化合物、含氨物質(zhì)和礦質(zhì)鹽類等。按所用原料不同可分為兩類:應(yīng)用化學(xué)藥品配成并標(biāo)明成分的,稱為合成培養(yǎng)基或綜合培養(yǎng)基,應(yīng)用肉湯、馬鈴薯汁等天然成分配成,稱為天然培養(yǎng)基。又因加入或不加入賦形劑可分為固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。
相關(guān)研究[2]
RPMI是RoswellParkMemorialInstitute的縮寫,代指洛斯維·帕克紀(jì)念研究所。RPMI是該研究所研發(fā)的一類細(xì)胞培養(yǎng)基,1640是培養(yǎng)基代號。其中含有10%胎牛血清。RPMI1640培養(yǎng)基與其他培養(yǎng)基不同,因為它含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養(yǎng)基含有生物素,維生素B12和PABA,這些在Eagle'sMinimalEssentialMedium或Dulbecco'sModifiedEagleMedium中均未發(fā)現(xiàn)。此外,維生素肌醇和膽堿以非常高的濃度存在。RPMI1640培養(yǎng)基不含蛋白質(zhì),脂質(zhì)或生長因子;因此,需要補(bǔ)充,通常含有10%胎牛血清(FBS)。RPMI1640培養(yǎng)基使用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)(2.0g/L),因此需要5-10%的CO2環(huán)境來維持生理pH值。粉末形式的Gibco®細(xì)胞培養(yǎng)基需要在制備時補(bǔ)充碳酸氫鈉,調(diào)節(jié)pH和過濾。RPMI-1640Medium,Modified儲存條件2-8℃。
有研究探討改良RPMI1640培養(yǎng)基對CIK細(xì)胞體外增殖的影響,為臨床治療提供質(zhì)量好、數(shù)量多的CIK細(xì)胞。方法用淋巴細(xì)胞分離液提取淋巴細(xì)胞,分別采用傳統(tǒng)RPMI1640培養(yǎng)基和改良RPMI1640培養(yǎng)基培養(yǎng),于培養(yǎng)當(dāng)天及3、6、9、12、15、18d,采用臺盼藍(lán)拒染法計數(shù)細(xì)胞,檢測細(xì)胞的增殖水平;流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞表型;MTT法檢測CIK細(xì)胞的體外細(xì)胞毒活性。結(jié)果培養(yǎng)至第12天后,改良培養(yǎng)基培養(yǎng)條件下,CIK細(xì)胞的增殖倍數(shù)明顯高于傳統(tǒng)培養(yǎng)基培養(yǎng)的CIK細(xì)胞(P0.05);CD3+CD56+細(xì)胞比例達(dá)33%以上;培養(yǎng)15d,對BGC-823和SPC-A-1細(xì)胞的細(xì)胞毒活性均高于傳統(tǒng)培養(yǎng)基。結(jié)論改良RP-MI1640培養(yǎng)基較傳統(tǒng)RPMI1640培養(yǎng)基可更好地促進(jìn)CIK細(xì)胞增殖,為其臨床應(yīng)用提供了試驗數(shù)據(jù)。
主要參考資料
[1] 中國衛(wèi)生管理辭典
[2] 改良RPMI1640培養(yǎng)基對CIK細(xì)胞增殖的影響