背景[1-3]
OCI-LY19人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞系于1987年從一名27歲的B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）（彌漫性大細(xì)胞淋巴瘤，DLCL，4B期，復(fù)發(fā)）的女性的骨髓中建立的懸浮生長(zhǎng)單圓形細(xì)胞系。
該細(xì)胞具有4％多倍體的人類(lèi)超二倍體核型-48（46-52）2 X，-X，+6，+6，+8，t（4;8）（q32;q24），del（6）（q15）x2，r（8），t（14;18）（q32;q21），add（18）（q23）-攜帶影響IGH-BCL2并置的t（14;18），CD3-，CD10+，CD13-，CD19+，CD20（+），CD37-，CD38+，cyCD79a+，CD80+，CD138+，HLA-DR+;培養(yǎng)基： 80％MEMα（GIBCO 12561-056）+20％FBS。
彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤是NHL中最常見(jiàn)的類(lèi)型，幾乎占所有病例的1/3。這類(lèi)淋巴瘤占以前臨床上的“侵襲性”或“中高度惡性”淋巴瘤的大多數(shù)病例。彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤正確的診斷需要血液病理學(xué)專(zhuān)家根據(jù)合適的活檢和B細(xì)胞免疫表型的證據(jù)而得出。
OCI-LY19 人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞
細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
應(yīng)用[4][5]
用于人淋巴瘤細(xì)胞株OCI-Ly19生物學(xué)特性研究和小鼠模型建立研究
彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)是成人淋巴瘤中最常見(jiàn)的病理類(lèi)型，DLBCL分型對(duì)指導(dǎo)疾病的治療和預(yù)后有較大的意義。
探索DLBCL細(xì)胞株OCI-Ly19的體外培養(yǎng)條件和生物學(xué)特性,腫瘤相關(guān)分子的表達(dá)及DLBCL動(dòng)物模型的建立方法。
方法：觀察OCI-Ly19細(xì)胞生長(zhǎng)形態(tài)及生物學(xué)特性,分析比較不同實(shí)驗(yàn)條件對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,用流式細(xì)胞術(shù)分析相關(guān)抗原表達(dá),將OCI-Ly19細(xì)胞皮下接種SCID小鼠,觀察腫瘤生長(zhǎng)狀況及組織學(xué)形態(tài)。
結(jié)果：OCI-Ly19細(xì)胞在適當(dāng)培養(yǎng)條件下生長(zhǎng)良好,多數(shù)重要的B細(xì)胞和腫瘤相關(guān)標(biāo)記物均有不同程度的表達(dá);未經(jīng)照射的SCID小鼠皮下接種107個(gè)OCI-Ly19細(xì)胞,成瘤率75%,組織學(xué)特征符合人類(lèi)DLBCL的特點(diǎn)。
結(jié)論：獲得了OCI-Ly19細(xì)胞株體外培養(yǎng)的條件及相關(guān)免疫標(biāo)志物表達(dá)情況。成功構(gòu)建了人DLBCL的小鼠模型,為進(jìn)一步進(jìn)行相關(guān)研究提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
參考文獻(xiàn)
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