背景[1-3]
人Α1微球蛋白(Α1-MG)ELISA試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（elisa）檢測樣品中人Α1微球蛋白(Α1-MG)的含量。
實驗原理：往預先包被人α1微球蛋白(α1-MG)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人α1微球蛋白(α1-MG)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。
Α1微球蛋白(Α1-MG)
操作步驟：
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
應用[4][5]
用于血α1、β2微球蛋白，胱抑素C，尿微量白蛋白對高血壓早期腎損害的診斷價值研究
對比血液中α1微球蛋白,β2微球蛋白,胱抑素C,尿微量白蛋白的陽性率,評價這些指標診斷高血壓早期腎損害的陽性率。
方法：研究對象為高血壓病患者120例,其中男性患者58例,女性患者62例,患者年齡分布于35-65歲之間,其中年齡為65歲,最小為37歲,平均年齡（54.30±8.26）歲.其中高血壓I級患者18例,男性患者11例,女性患者7例;高血壓Ⅱ級38例,男性患者16例,女性患者22例。
高血壓Ⅲ級患者64例,男性患者31例,女性患者33例;病程小于5年的患者43例,其中男性患者18例,女性患者25例,病程5-10年的患者48例,其中男性患者23例,女性患者25例,病程大于10年的患者29例,其中男性患者17例,女性患者12例。
所有患者均血壓控制不佳,未規(guī)律應用降壓藥物,入院時血壓較高。
入選標準符合《中國高血壓防治指南2010年修訂版》,患者肌酐、尿素氮（BUN）、尿蛋白均處于正常水平,并排除:繼發(fā)性高血壓、糖尿病、惡性腫瘤、結核病、結締組織病、急慢性肝炎、腎病、藥物影響等影響檢出結果的疾病。
同時選取同期健康體檢者40例,年齡分布于35-65歲之間,其中年齡為64歲,最小為35歲,平均年齡（51.95±6.36）歲,其中男性17例,女性23例,無高血壓病、糖尿病、惡性腫瘤、結核病、結締組織病、急慢性肝炎、腎病等影響檢出結果的疾病。
實驗組與對照組年齡、性別均無統(tǒng)計學差異。將120例高血壓病患者設置為實驗組,40例健康體檢者設置為對照組。實驗組根據患者高血壓等級分為I組（高血壓I級患者）、Ⅱ組（高血壓Ⅱ級患者）、Ⅲ組（高血壓Ⅲ級患者）;根據患者病程分為5年組（高血壓病程<5年）、10年組（高血壓病程5-10年）、長期組（高血壓病程>10年）。
實驗組與對照組皆空腹采靜脈血3 m L,測定血液中α1-MG、β2-MG、Cys C、肌酐含量;并留取清潔中段尿5m L,測量尿中m ALb含量。血α1-MG、β2-MG、Cys C、肌酐、m ALb含量測定均由檢驗科生化室完成。
尿m ALb含量由迪瑞H-800全自動尿分析儀測定,血α1-MG、β2-MG、Cys C、肌酐由貝克曼DXC-800全自動生化分析儀測定。對比實驗組與對照組間各項生化指標的差異,同時對比實驗組內這些生化指標的組間差異。
β2-MG正常參考值0.802.80mg·L-1、α1-MG正常參考值1030mg·L-1、Cys C正常參考值0.561.15mg·L-1、肌酐正常參考值44106μmol·L-1。尿微量白蛋白正常參考值<0.15g·L-1,并非精確數值,故僅比較其陽性率。
參考文獻
[1]Serum cystatin C as a marker of renal function in detection of early acute kidney injury[J].M.S.N.Murty,U Sharma,V Pandey,S Kankare.Indian Journal of Nephrology.2013(3)
[2]EFFECT OF SPIRONOLACTONE TREATMENT ON MICROALBUMINURIA AND PROTEINURIA IN PATIENTS WITH RESISTANT ARTERIAL HYPERTENSION[J].European Journal of Internal Medicine.2011
[3]Global burden of hypertension:analysis of worldwide data[J].Patricia M Kearney,Megan Whelton,Kristi Reynolds,Paul Muntner,Paul K Whelton,Jiang He.The Lancet.2005(9455)
[4]Serum Cystatin C as a New Marker for Noninvasive Estimation of Glomerular Filtration Rate and as a Marker for Early Renal Impairment[J].American Journal of Kidney Diseases.2000(1)
[5]李文耀.血α1、β2微球蛋白，胱抑素C，尿微量白蛋白對高血壓早期腎損害的診斷價值[D].吉林大學,2016.