背景^[1]

凝血酶 (thrombin) 是由凝血酶原活化變成的一種專一性很強的絲氨酸蛋白類水解酶, 是機體凝血系統(tǒng)中的天然成分。凝血酶由308個氨基酸殘基所組成, 相對分子質量 (Mr) 為36 000;它是一個雙鏈分子, 由A、B兩條鏈組成, 兩條鏈之間由二硫鍵連接。凝血酶在體內以凝血酶原形式存在, 在凝血過程中, 凝血酶原復合物將其激活而轉變?yōu)橛薪z氨酸蛋白類水解活性的凝血酶, 從而促進血液凝塊的形成。由于凝血酶在止血與凝血、組織修復和創(chuàng)傷愈合等方面療效顯著, 具有廣闊的市場前景, 目前已成為國內外研究的熱點。

目前市售的凝血酶制品主要來源于動物血漿 (包括牛、羊、豬、蛇) 或人血漿, 這類凝血酶不僅可能引起人體的異源性免疫反應, 而且具有傳播巨細胞病毒 (CMV) 、EB病毒 (EBV) 、人乳頭瘤病毒 (HPV) 、甲型肝炎病毒 (HAV) 及克雅氏病毒 (CJDV) 等病毒的風險性, 尤其是牛源性凝血酶。因此, 利用基因工程方法制備凝血酶制品成為解決這一問題的最理想的途徑。

凝血反應^[2]

凝血反應是一組極其復雜的反應,其具體機制尚不完全明確。大量的研究表明,在凝血反應的起始階段,組織因子(tissue factor,TF)發(fā)揮著重要作用。當血管受到損傷時,內皮細胞和血管組織中的組織因子暴露在血液中,并由非活化型組織因子轉變?yōu)榛罨徒M織因子。活化的組織因子和凝血七因子FⅦ結合形成復合物,并激活凝血十因子FX,活化型十因子FXa催化凝血酶原生成凝血酶(thrombin)。

凝血酶又通過激活凝血十一因子FⅪ和凝血五因子FV等凝血因子而放大凝血反應,從而生成更多的凝血酶。凝血酶切割纖維蛋白原產(chǎn)生不可溶的纖維蛋白,纖維蛋白和部分血細胞形成血栓塊。凝血酶是銜接凝血反應激活和纖維蛋白形成的重要一環(huán),在凝血反應中起著一個非常關鍵的作用,凝血酶的生成量可以間接的表示凝血反應的激烈程度。

參考文獻

[1] 重組人凝血酶真核表達載體的構建及其在CHO細胞中的穩(wěn)定表達.劉霞 劉飛 劉少英

[2] 蛋白二硫鍵異構酶調控組織因子介導的凝血酶生成.陳鳳梧 魯翌