背景及概述^[1]

雷公藤又名黃藤、黃藤木、黃臘藤、黃檀根、斷腸草等，屬衛(wèi)茅科植物。味辛、苦，性涼，有大毒，歸心、肝、脾、腎經(jīng)，有清熱解毒，祛風(fēng)除濕，舒筋活血通絡(luò)，消腫止痛，殺蟲止癢之功。臨床常用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、慢性腎炎、紅斑狼瘡等難治性免疫功能亢進疾病。雷公藤乙素（Tripdiolide），又名雷公藤內(nèi)酯二醇，是雷公藤中的一種二萜內(nèi)酯類成分。雷公藤乙素是雷公藤的主要活性成分，也是雷公藤多苷片和雷公藤總萜片的主要有效成分。

結(jié)構(gòu)

應(yīng)用^[2-3]

雷公藤是治療自身免疫疾病的藥物，它含有多種有效成分，如雷公藤甲素、雷公藤乙素、雷公藤紅素等。這些有效成分對多種免疫細胞有復(fù)雜的影響，包括抑制增殖、誘導(dǎo)凋亡及改變細胞因子分泌等。研究表明雷公藤乙素具有抗炎、免疫抑制、抗腫瘤以及治療糖尿病腎病等作用，具有很好的藥用開發(fā)前景。

1）治療糖尿病。雷公藤乙素能有效降低腎臟中TGF-β1的含量，抑制TGF-β1對VEGF的誘導(dǎo)表達，修復(fù)和保護腎臟，對DN起到治療的作用。以鏈狀佐菌素(STZ)制備DN大鼠模型，雷公藤乙素、纈沙坦灌胃給藥12周，實驗期間檢測大鼠24h尿樣、血樣，12周后一次性處死大鼠，對各組腎臟標(biāo)本進行常規(guī)病理檢測，觀察DN腎臟結(jié)構(gòu)的修復(fù)狀況，用免疫組化SABC法檢測各組腎組織內(nèi)VEGF的表達，用酶聯(lián)免疫(ELISA)雙抗夾心法檢測TGF-β1在大鼠腎組織和血清中的實際含量。結(jié)果顯示雷公藤乙素能降低大鼠24h尿量、尿蛋白量、血糖(BG)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)各值及TGF-β1在腎組織和血清中的含量，影響DN大鼠腎組織中VEGF和TGF-β1的表達，保護腎臟。

2）雷公藤乙素尤其適用于有毒蜂蜜的識別和鑒定，以及蜜蜂中毒人群的早期診斷。闡明有毒蜂蜜的致毒的物質(zhì)基礎(chǔ)，識別和鑒定出其生物標(biāo)志物具有重要意義。有毒蜂蜜一旦流入市場，將會嚴(yán)重危害蜂蜜消費者的生命健康?；谟卸痉涿鄣纳飿?biāo)志物可以快速開發(fā)出其鑒別方法，從而為監(jiān)控有毒蜂蜜的分布、流通以及蜂蜜中毒事件的快速診斷提供技術(shù)支撐。雷公藤乙素作為雷公藤和昆明山海棠的特征性化合物，通過檢測蜂蜜中是否含有雷公藤乙素來鑒別蜂蜜是否含有雷公藤有毒蜂蜜。

制備^[1]

一種從雷公藤中制備雷公藤乙素的方法，該法與現(xiàn)有方法比較，具有提取制備過程相對簡單、設(shè)備要求低、產(chǎn)品得率高、純度高、適合雷公藤乙素的大規(guī)模分離制備等優(yōu)勢。技術(shù)方案如下：

1）將雷公藤根切片，用3～10倍量的乙醇水溶液（70%～95%）加熱回流提取3次，每次1.5小時，合并提取液，減壓濃縮回收乙醇得到總浸膏。將總浸膏用乙酸乙酯溶解數(shù)次至不再溶解，合并乙酸乙酯溶液，減壓濃縮回收乙酸乙酯得乙酸乙酯部位。

2）將乙酸乙酯部位經(jīng)10～30倍量中性氧化鋁色譜柱層析，先用石油醚—乙酸乙酯（2：3，V/V）洗脫，洗脫液棄去，再用乙酸乙酯—甲醇（3：1，V/V）洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得中性氧化鋁色譜柱洗脫部位。

3）將中性氧化鋁色譜柱洗脫部位經(jīng)MCIGEL色譜柱層析，先用甲醇—水（1：3，V/V）洗脫，洗脫液棄去，再用甲醇—水（1：1，V/V）洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得MCIGEL色譜柱洗脫部位。

4）將MCIGEL色譜柱洗脫部位經(jīng)10～30倍量硅膠色譜柱層析，先用石油醚—乙酸乙酯（7：4，V/V）洗脫，洗脫液棄去，再用石油醚—乙酸乙酯（1：1，V/V）洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得硅膠色譜柱洗脫部位，并析出雷公藤乙素粗品。

5）將雷公藤乙素粗品用乙酸乙酯結(jié)晶，得到雷公藤乙素粗晶，再用乙酸乙酯重結(jié)晶1～2次，得雷公藤乙素純晶，采用雷公藤乙素對照品對照HPLC法以及核磁共振波譜法鑒定產(chǎn)品。經(jīng)HPLC檢測雷公藤乙素含量大于99%。相對于雷公藤藥材中雷公藤乙素的量，該法制得雷公藤乙素產(chǎn)品得率大于90%。

主要參考資料

[1] CN201610003311.2從雷公藤中制備雷公藤乙素的方法

[2] 雷公藤乙素對糖尿病腎病大鼠腎臟中轉(zhuǎn)化生長因子β1的影響

[3] CN201710939867.7雷公藤乙素作為有毒蜂蜜的生物標(biāo)志物的應(yīng)用