背景及概述^[1]

C2C12/小鼠成肌細(xì)胞C2C12是D.Yaffe和O.Saxel建立的小鼠成肌細(xì)胞株的亞克隆(由H.Blau等人構(gòu)建)。C2C12/小鼠成肌細(xì)胞C2C12分化很快，形成可伸縮的肌管并生成特性的肌蛋白。用骨形成蛋白2(BMP-2)處理，導(dǎo)致分化途徑從成肌細(xì)胞轉(zhuǎn)換成成骨細(xì)胞。檢測(cè)表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。培養(yǎng)條件：培養(yǎng)基為90%DMEM高糖+10%胎牛血清+1%P/S；培養(yǎng)溫度為37℃；氣相條件為95%空氣，5%二氧化碳。

相關(guān)研究^[1]

C2C12/小鼠成肌細(xì)胞C2C12僅供科研研究使用。有研究探討香煙煙霧濃縮物(CSC)對(duì)C2C12/小鼠成肌細(xì)胞C2C12分化的影響。C2C12/小鼠成肌細(xì)胞C2C12傳代后分為對(duì)照組、0.3%CSC孵育組、3%CSC孵育組，細(xì)胞在含有馬血清的DMEM培養(yǎng)基第6-7d可分化成熟的肌細(xì)胞。細(xì)胞分別在第1d、第3d在相應(yīng)組中加入CSC，并在第6d進(jìn)行各項(xiàng)檢測(cè)：通過光學(xué)顯微鏡來觀察細(xì)胞形態(tài)的變化，通過酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽(GSH)和肌酸磷酸激酶(CK)的濃度，應(yīng)用Western印跡檢測(cè)肌球蛋白重鏈(MYHC)的蛋白表達(dá)，通過凝膠遷移率阻滯實(shí)驗(yàn)來檢測(cè)轉(zhuǎn)錄因子核因子-κB(NF-κB)的活性。結(jié)果顯示在細(xì)胞形態(tài)上0.3%和3%的CSC能夠抑制骨骼肌肌管的形成；0.3%和3%CSC處理組細(xì)胞中GSH和CK的含量較對(duì)照組明顯減少，在0.3%和3%的CSC孵育組中MYHC蛋白表達(dá)明顯減少，0.3%和3%的CSC孵育組中NF-κB的活性較對(duì)照組明顯增強(qiáng)。因此CSC一方面加重細(xì)胞氧化應(yīng)激，使細(xì)胞的GSH減少，同時(shí)導(dǎo)致細(xì)胞的炎癥反應(yīng)增加，導(dǎo)致NF-κB的活性增加。二者相互作用引起骨骼肌細(xì)胞的分化明顯減弱。

主要參考資料

[1] 香煙對(duì)小鼠C2C12 成肌細(xì)胞分化的影響