簡介

前期研究發(fā)現(xiàn)昔美酸沙美特羅能降低Ⅱ型糖尿病SD大鼠的血糖，后進(jìn)行分子動力學(xué)研究發(fā)現(xiàn)其與PPARγ受體結(jié)合度比較高。因此研究人員通過建立胰島素抵抗細(xì)胞模型并結(jié)合Western Blot、IHC、ICC和qRT-PCR實(shí)驗(yàn)方法對昔美酸沙美特羅降糖并改善胰島素抵抗的作用機(jī)制進(jìn)行初步的探究。

昔美酸沙美特羅的性狀

作用機(jī)制

經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室前期的實(shí)驗(yàn)研究證明，昔美酸沙美特羅具有TZDs類作用，能降低Ⅱ型糖尿病SD大鼠的血糖，改善胰島素抵抗，因此本課題對昔美酸沙美特羅降血糖改善胰島素抵抗的作用機(jī)制進(jìn)行了初步研究。通過對昔美酸沙美特羅進(jìn)行與PPARγ受體結(jié)合的分子動力學(xué)模擬研究，確定了昔美酸沙美特羅能夠與PPARγ很好的結(jié)合從而發(fā)揮其生理學(xué)效應(yīng)，理論性地確定了昔美酸沙美特羅屬于PPARγ的激動劑，并且能夠很好與其受體相結(jié)合作用。Westernblot結(jié)果顯示昔美酸沙美特羅能夠上調(diào)磷酸化AMPKα1、磷酸化AKT2和磷酸化Ser112位的PPARγ蛋白的表達(dá)，同時上調(diào)ADIPOQ的蛋白表達(dá)，并且下調(diào)由CDK5介導(dǎo)的Ser273位的PPARγ磷酸化，大量文獻(xiàn)表明高抑制PPARγSer273磷酸化的配體是最佳候選抗糖尿病藥物，此結(jié)論與WeiliZheng等人的研究成果相符?3??。在我們同時加入昔美酸沙美特羅和高選擇性PPARγ抑制劑T0070907后，發(fā)現(xiàn)磷酸化的AMPKα1、AKT2和Ser112位的PPARγ磷酸化都沒有上調(diào)，p-PPARγSer273的磷酸化抑制效果也消失，這足以說明昔美酸沙美特羅確實(shí)是作用于PPARγ（前期也是針對PPARγ受體虛擬篩選得到的昔美酸沙美特羅），并且通過PPARγ影響AMPKα1和AKT2，進(jìn)而改善胰島素抵抗。但ADIPOQ在加入T0070907后仍然表現(xiàn)為表達(dá)上調(diào)，說明昔美酸沙美特羅調(diào)節(jié)ADIPOQ并不依賴PPARγ的表達(dá)，因此昔美酸沙美特羅改善胰島素抵抗可能是以AMPK/AKT通路為主，以ADIPOQ為輔。

免疫組化實(shí)驗(yàn)和免疫細(xì)胞組化實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，昔美酸沙美特羅同樣能上調(diào)SD大鼠肝組織、胰腺組織的PPARγSer112、p-AKT2、AMPKα1及ADIPOQ的表達(dá)，并抑制p-PPARSer273。但最佳劑量組別并不一致，可能是因?yàn)镾D大鼠的個體差異性，或者將樣本量進(jìn)一步擴(kuò)大。qRT-PCR的結(jié)果也顯示昔美酸沙美特羅上調(diào)了AMPKα1和ADIPOQ的mRNA的表達(dá)[1]。

參考文獻(xiàn)

[1] 宰小麗. 794ap（昔美酸沙美特羅）改善胰島素抵抗機(jī)制的初步研究[D]. 重慶理工大學(xué), 2017.