M-17肉湯是一種專(zhuān)門(mén)用于培養(yǎng)乳酸鏈球菌及其噬菌體的選擇性液體培養(yǎng)基，在乳品微生物學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用廣泛。M-17肉湯由Terzaghi和Sandine在1975年研發(fā)，其設(shè)計(jì)是為了滿(mǎn)足乳酸鏈球菌這類(lèi)“苛養(yǎng)菌”的特殊生長(zhǎng)需求。它的主要包含以下幾個(gè)關(guān)鍵部分，豐富的營(yíng)養(yǎng)源，通過(guò)多種蛋白胨和酵母提取物提供碳源、氮源、維生素等生長(zhǎng)因子；強(qiáng)大的緩沖系統(tǒng)，這是M-17肉湯最顯著的特點(diǎn)。乳酸鏈球菌在生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)大量產(chǎn)酸，過(guò)低的pH會(huì)抑制其生長(zhǎng)。培養(yǎng)基中添加的β-甘油磷酸二鈉具有極佳的緩沖能力，能將活躍生長(zhǎng)期培養(yǎng)物的pH維持在5.7以上，即使是在30°C下培養(yǎng)24小時(shí)后也是如此，從而保護(hù)細(xì)胞免受損傷；特殊生長(zhǎng)促進(jìn)劑，抗壞血酸（維生素C）對(duì)乳酸鏈球菌的生長(zhǎng)有刺激作用。

主要應(yīng)用

M-17肉湯用于從酸奶、奶酪發(fā)酵劑和其他乳制品樣品中，選擇性地分離和計(jì)數(shù)乳酸鏈球菌，由于出色的緩沖能力，M-17肉湯非常適合作為發(fā)酵劑培養(yǎng)物（starter cultures）的保存培養(yǎng)基，且對(duì)其后續(xù)產(chǎn)酸能力影響很小，該培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)允許在加入鈣離子的情況下不產(chǎn)生沉淀，而鈣離子是乳酸菌噬菌體檢測(cè)所必需的，因此M-17肉湯常與M-17瓊脂（M17 Agar）聯(lián)合使用，用于乳酸鏈球菌噬菌體的檢測(cè)和實(shí)驗(yàn)。

M-17肉湯培養(yǎng)基的制備

配方為：胰蛋白胨5.0g，牛肉膏5.0g，大豆蛋白胨5.0g，酵母浸膏2.5g，抗壞血酸0.5g，硫酸鎂0.25g，磷酸甘油二鈉19.0g，乳糖5g，瓊脂11g，蒸溜水1000mL。用NaOH調(diào)節(jié)pH至6.9±0.2，121℃蒸汽滅菌15min^[1]。

M-17肉湯的標(biāo)準(zhǔn)操作流程

稱(chēng)取42.25克培養(yǎng)基粉末，加入1000毫升純化水或蒸餾水中，攪拌加熱至完全溶解。將溶解好的培養(yǎng)基分裝至適宜容器，在121°C，壓力15 psi下進(jìn)行高壓蒸汽滅菌15分鐘。滅菌后，未使用的培養(yǎng)基粉末應(yīng)儲(chǔ)存在10-30°C的干燥環(huán)境中，制備好的液體培養(yǎng)基建議在2-8°C下冷藏。

M-17肉湯的改良

M-17肉湯培養(yǎng)基是酸奶中嗜熱鏈球菌計(jì)數(shù)的重要培養(yǎng)基，它也是從酸奶或牛奶中分離嗜熱鏈球菌的常用培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基培養(yǎng)嗜熱鏈球菌時(shí)間長(zhǎng)，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要對(duì)其進(jìn)行改良。通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，采用改良M-17肉湯培養(yǎng)基不僅能提高酸奶中嗜熱鏈球菌計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確度，而且能縮短嗜熱鏈球菌培養(yǎng)時(shí)間，提高工作效率。證實(shí)改良M-17肉湯培養(yǎng)基的性能優(yōu)于M-17肉湯培養(yǎng)基，它更適合嗜熱鏈球菌生長(zhǎng)。采用改良M-17肉湯培養(yǎng)基不僅能提高酸奶中嗜熱鏈球菌計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確度，而且能縮短嗜熱鏈球菌培養(yǎng)時(shí)間，提高效率。 同時(shí)改良M-17肉湯培養(yǎng)基既可用于酸奶嗜熱鏈球菌的檢驗(yàn)，還可用于酸奶球桿菌比例的控制和跟蹤，提高酸奶有效保質(zhì)期。嗜熱鏈球菌在改良M-17肉湯液體培養(yǎng)基的生長(zhǎng)曲線(xiàn)上穩(wěn)定期長(zhǎng)，適合于嗜熱鏈球菌的液體增菌以及該菌菌種保藏方面的研究^[1]。

參考文獻(xiàn)

[1] 曹文海,任國(guó)譜,. 嗜熱鏈球菌的檢驗(yàn)培養(yǎng)基( M17)的改良[J]. 乳品加工, 2006, (01): 46-48.