簡介

胎牛血清(FBS)是目前干細胞培養(yǎng)中常規(guī)應(yīng)用的添加劑，但其有感染病毒或細菌的潛在風(fēng)險，此外胎牛血清培養(yǎng)后的細胞含有異體蛋白，并且擴增后也難以清除，Spees等證實應(yīng)用胎牛血清擴增獲得的10?個骨髓間充質(zhì)干細胞含730 mg胎牛血清(FBS)蛋白，可引起免疫反應(yīng)[1]。

胎牛血清(FBS)的性狀

對細胞生長情況和形態(tài)的影響

由10%的胎牛血清(FBS)進行原代培養(yǎng)，傳代至第2代（P?）時開始分組，加入不同濃度胎牛血清(FBS)分別為0%，2.5%，5%，7.5%，10%的共五組，各組培養(yǎng)條件下孵育出的骨髓間充質(zhì)干細胞在生長形態(tài)上未見明顯的差異性。分組后傳代培育的骨髓間充質(zhì)干細胞孵育，24h后觀察，倒置相差顯微鏡下發(fā)現(xiàn)有貼壁生長的細胞，呈不規(guī)則的星狀，三角形狀，多角形狀，類圓形狀，少數(shù)細胞呈長梭形；0%，2.5%，5%，7.5%，10%各組的貼壁細胞數(shù)呈階梯樣依次增加。3天后首次換各組對應(yīng)的培養(yǎng)液，隨后每隔2 d更換培養(yǎng)基，全量換液，逐漸純化骨髓間充質(zhì)干細胞。孵育到第7天時，觀察見各組貼壁細胞生長狀況良好，0%組貼壁細胞體積較大，核位于細胞中央，呈圓形，懸浮細胞較多。2.5%，5%，7.5%，10%組的大部分細胞呈短梭形，或由數(shù)個細胞組成小集落，核清晰，前三者間的細胞貼壁率差異不大；10%組的培養(yǎng)液中，可見少量的懸浮細胞，大部分細胞貼壁良好，細胞呈長梭形生長。孵育到第14天，倒置顯微鏡下觀察，見0%組細胞呈短梭形或長梭形，排列較疏松；2.5%，5%，7.5%，10%組骨髓間充質(zhì)干細胞在瓶底約覆蓋90%，細胞呈現(xiàn)長梭形，局部呈漩渦狀；0%，2.5%，5%，7.5%，10%各組均鋪滿瓶底，但生長狀態(tài)存在差異，傳至第四代，細胞呈長梭形，排列緊密呈漩渦狀[1]。

參考文獻

[1] 孫國棟. 不同濃度胎牛血清培養(yǎng)下骨髓間充質(zhì)干細胞誘導(dǎo)為心肌樣細胞的比較[D]. 山西醫(yī)科大學(xué), 2015.