背景[1-7]
PureLink RNA小量試劑盒提供了一種簡單、可靠且快速的柱式方法，適用于各種來源的高質量總RNA提取，且無需使用諸如酚等危險試劑。從動物和植物細胞、組織及血液、細菌、酵母和液體樣本中獲取高產量、高度完整的RNA。PureLink RNA小量試劑盒包括了足夠完成50次RNA純化的RNA裂解液、離心柱、洗脫管、回收管、洗脫緩沖液和無RNA酶的水。
PureLink RNA小量試劑盒可從多種細胞和組織類型中快速進行總RNA純化，一次提取可獲得至多1000µg的純化RNA。從少量到中量的起始材料可獲得高質量的總RNA，且無基因組DNA污染。
PureLink RNA小量試劑盒結合了異硫氰酸胍裂解的無毒性以及硅膠膜純化技術的快速、純度高、易于使用的優(yōu)點。這種安全、簡便的流程可在不到20分鐘的時間內完成，且無需使用危險的酚/氯仿抽提、CsCl離心、LiCl或乙醇沉淀。PureLink RNA小量試劑盒可高效分離高質量的總RNA，同時去除大部分基因組DNA。通常，需要來自動物組織或哺乳動物細胞系的RNA的大多數應用不需要額外的DNA酶處理。然而，一些應用，例如通過qRT-PCR進行基因表達分析而沒有內含子跨越引物或使用來自具有非常小或沒有內含子的生物體的樣品可能需要更完全去除殘留的污染DNA。
應用[8][9]
PureLink RNA小量試劑盒可用于人同源盒基因NKX3.1表達調控的研究：
前列腺癌是男性腫瘤疾病中發(fā)病率最高的惡性腫瘤之一,在發(fā)達國家中其死亡率高居第二位,在我國其發(fā)病率也有逐年增高的趨勢。前列腺癌的發(fā)生,發(fā)展和轉移與NKX3.1密切相關。NKX3.1是前列腺特異表達的、受雄激素調節(jié)的同源盒基因,在前列腺胚胎發(fā)育、上皮分化及腫瘤發(fā)生發(fā)展中起重要作用。在胚胎形成過程中,NKX3.1的表達可作為前列腺上皮分化的重要標志。
NKX3.1基因敲除的老鼠顯示前列腺上皮發(fā)育不良、腺管形態(tài)異常和蛋白分泌障礙,表明NKX3.1對于前列腺的正常發(fā)育及維持前列腺上皮的正常分化是必需的。而且NKX3.1基因敲除鼠隨著年齡的增長,出現(xiàn)了類似于人前列腺上皮內瘤的病理變化,表明NKX3.1缺失可能與前列腺癌的起始有關。人同源盒基因NKX3.1位于染色體8p21,包括兩個外顯子,一個內含子,較短的5′-非翻譯區(qū)和較長的3′-非翻譯區(qū)。
約80%的前列腺腫瘤中存在該區(qū)域的雜合缺失,表明NKX3.1在前列腺癌中可能作為抑癌基因發(fā)揮作用。但也有研究顯示不同的結果,有研究表明在前列腺癌標本中存在NKX3.1過表達情況,同時比較轉移灶與原發(fā)灶的NKX3.1的表達情況,發(fā)現(xiàn)轉移灶中NKX3.1過表達明顯高于原發(fā)灶,說明NKX3.1過表達可能與前列腺癌的侵襲性有關。
參考文獻
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