背景[1-6]
小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞試劑盒適合于培養(yǎng)和分離小鼠的神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞。小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒包含：（1）OptiTDSTM小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞組織解離液（2）小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞組織處理緩沖液（3）FibrOutTM小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞成纖維抑劑。
神經(jīng)是神經(jīng)纖維構(gòu)成的組織，把腦和脊髓的興奮傳給各個(gè)器官或把各個(gè)器官的興奮傳給腦和脊髓。其中，鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)膠質(zhì)形成的主要功能細(xì)胞。神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中，當(dāng)程序性細(xì)胞死亡時(shí)，或在大腦發(fā)育的過程中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時(shí)，神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細(xì)胞。膠質(zhì)細(xì)胞能在II類組織相容性復(fù)合體表達(dá)CD-4陽性Ｔ細(xì)胞時(shí)表達(dá)抗原，能進(jìn)行Fc介導(dǎo)的巨噬作用，并且與造血細(xì)胞和巨噬細(xì)胞組織共享抗原。
利用試劑盒中提供的神經(jīng)組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的神經(jīng)組織能使得神經(jīng)組織中小膠質(zhì)細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將小膠質(zhì)細(xì)胞分離開來。神經(jīng)是神經(jīng)纖維構(gòu)成的組織本試劑盒適用于分離培養(yǎng)小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞。體系提供了組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以程度地降低所培養(yǎng)的小膠質(zhì)原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。
應(yīng)用[7][8]
小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞試劑盒可用于小膠質(zhì)細(xì)胞在EAE小鼠模型中的保護(hù)作用研究：
利用EAE小鼠模型探討小膠質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)保護(hù)作用。
方法:
1.本研究用髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白35-55(MOG35-55)免疫C57BL/6小鼠誘導(dǎo)EAE模型,按照隨機(jī)分組的原則將72只小鼠分為正常對照組、EAE模型組、Tuftsin干預(yù)組三組;免疫后第1天用微量注射泵在EAE小鼠皮下緩慢注射500μM Tuftsin對小鼠進(jìn)行干預(yù)治療,正常對照組與EAE模型組用微量注射泵皮下注射生理鹽水。從免疫后第1天開始采用國際公認(rèn)的神經(jīng)功能評分標(biāo)準(zhǔn)對各組小鼠進(jìn)行神經(jīng)功能評分。
2.分別在免疫后第7天、14天、21天及28天處死各組小鼠并取其腦和脊髓組織,行組織病理學(xué)LFB染色及MBP免疫組織化學(xué)染色,觀察并比較各組實(shí)驗(yàn)小鼠組織病理學(xué)改變的差異;通過RT-PCR方法檢測TNF-α、TGF-β、IL-10的含量;Western blot方法測定iba-1蛋白的含量。
結(jié)論:1.Tuftsin干預(yù)組小鼠發(fā)病率低,起病時(shí)間延長,神經(jīng)功能損害嚴(yán)重程度輕,且恢復(fù)較快。2.Tuftsin干預(yù)組小鼠脊髓組織的髓鞘脫失程度輕。3.Tuftsin干預(yù)組小鼠腦組織中的促炎因子水平低,抗炎因子水平高。4.Tufusin能夠促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞的激活及吞噬活性。5.小膠質(zhì)細(xì)胞在Tuftsin的刺激基礎(chǔ)上激活,能夠從促炎性表型M1轉(zhuǎn)化為抗炎性表型M2,從而發(fā)揮抗炎性作用,在EAE中發(fā)揮保護(hù)作用。
參考文獻(xiàn)
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