吸附法
收尿、沉淀、酸化 用特制塑料桶收集男性尿，尿液要求電導(dǎo)相當(dāng)于20～30m·Ω-1,Ph在6.5以下，細(xì)菌數(shù)在1000/ml以下，夏天加0.8%苯酚防腐。尿液須在8h內(nèi)處理完畢。將新鮮處理后的尿液冷卻到1010C以下，用氫氧化鈉（3nol/L）調(diào)節(jié)Ph到8.5，靜置1h，虹吸上清液，有鹽酸（3nol/L）中和OH-1至Ph5～5.5。得酸化的尿液。
新鮮男性尿NaOH,Ph8 →沉淀 上清尿液HCl,Ph5 →酸化酸化尿液
吸附、洗脫 取酸化后的尿液，每升尿液中加硅藻土10g（1%），在低于50C下不斷攪拌使之吸附1h。該吸附物用50左右冷水洗滌后，裝柱（柱比1：1），用氨水（0.02%）洗滌到流出溶液變清，再用含有氯化鈉（1mol/L）的氨水（0.02%）洗脫尿激酶，直到當(dāng)洗脫液變混時(shí)開始收集，收集量約為每噸尿收集15L洗脫液（100U/ml,3000U/mg）。
酸化尿硅藻土→吸附吸附冷 水50^→洗滌硅藻土柱NH3^·H2O→洗滌洗脫液
去熱原、色素 洗脫液用飽和磷酸二氫鈉調(diào)節(jié)Ph8，用氯化鈉調(diào)節(jié)電導(dǎo)相當(dāng)于22mm·Ω-1,通過QAE-Sephadex 色譜柱（該柱預(yù)先用pH8r磷酸緩沖液平衡），收集流出液。色譜柱應(yīng)用磷酸緩沖液（保留體積不少3倍的柱體積）不斷洗滌，并與流出液合并。
洗脫液QAE-Sephadex柱→去熱原、色素流出液
CMC濃縮 流出液用乙酸（1mol/L）調(diào)節(jié)Ph4.2，用蒸餾水調(diào)節(jié)電導(dǎo)相當(dāng)于 16～17mΩ-1,通過CMC色譜柱（該柱預(yù)先用0.1mol/L,Ph4.2的乙酸緩將溶液，電導(dǎo)相當(dāng)于17mΩ-1，平衡約12h）色譜柱繼續(xù)用不小于10倍柱體積的Ph4.2的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液洗滌色譜柱，洗脫完畢后，再用加氯化鈉（0.1mol/L）的氨水（0.1%），Ph11.5～11.8洗脫尿激酶，尿激酶洗脫液成絲狀流出，部分收集洗脫液（3000～40000U/ml,15000～20000U/mg）。
流出液CMC柱→濃縮}CMC柱NH3·H2,Ph11.5→洗滌洗脫液
透析、凍干 將洗脫液于40對(duì)水透析除鹽24h,換水3～4次，透析液離心去沉淀，凍干，即得尿激酶。
洗脫液水40;24h^→透析、凍干成品
除菌、分裝 將得到尿激酶抽檢合格后，稀釋，除菌，加入賦形劑，分裝，凍干，即得尿激酶制劑。
尿激酶賦形劑→除菌、凍干尿激酶制劑
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