雙抗體夾心法小鼠本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗小鼠VEGF-A抗體包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品（或標(biāo)準(zhǔn)品）中的小鼠VEGF-A會(huì)與包被抗體結(jié)合。后依次加入生物素化的抗小鼠VEGF-A抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素，抗小鼠VEGF-A抗體與結(jié)合在包被抗體上的小鼠VEGF-A結(jié)合，生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值，VEGF-A濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中VEGF-A的濃度。可檢測(cè)樣本中小鼠的VEGFA，且與其類似物無明顯交叉反應(yīng)。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A，也被稱為VEGFA，是由VEGFA基因編碼的蛋白質(zhì)，它在血管內(nèi)皮細(xì)胞中顯示出突出的活性，主要是通過它與內(nèi)皮細(xì)胞膜上顯著發(fā)現(xiàn)的VEGFR1和R2受體的相互作用。在體外，它可以刺激內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂和細(xì)胞遷移。它也是一種血管擴(kuò)張劑，可增加微血管通透性，最初被稱為血管通透性因子。它對(duì)于器官重塑和涉及血管的疾病，例如傷口愈合、腫瘤血管生成、糖尿病視網(wǎng)膜病變等至關(guān)重要。內(nèi)皮細(xì)胞的分化取決于VEGFA的表達(dá)，如果表達(dá)被廢除，那么它可能導(dǎo)致胚胎的死亡。它在神經(jīng)元的作用中是必不可少的，因?yàn)樗鼈円残枰芄?yīng)，并且從神經(jīng)祖細(xì)胞中消除它的表達(dá)將導(dǎo)致腦血管形成缺陷和神經(jīng)元凋亡。它可用于治療患有神經(jīng)退行性和神經(jīng)病態(tài)疾病的患者，還可以增加血管通透性，從而阻止血腦屏障并增加炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。