考馬斯亮藍染色液是指用于測定蛋白定性定量分析方法中的檢測試劑?？捡R斯藍染色法又稱Bradford法，是Bradford于1976年建立起來的一種蛋白質(zhì)濃度的測定方法。其主要利用Coomassie Brilliant Blue G-250這種酸性染料與蛋白質(zhì)在酸性環(huán)境下產(chǎn)生吸附，導(dǎo)致染料的最大吸光波長從465 nm變?yōu)?95 nm。通過制備不同濃度的牛血清白蛋白標準品液，與Bradford試劑混合后測定其595 nm吸光度值，繪制標準曲線。與標準品同量的樣品蛋白溶液與Bradford試劑混合。5 min后在595 nm波長下測定各樣品與標準品的吸光度。根據(jù)標準曲線，計算出各樣品的蛋白濃度。

考馬斯亮藍是一種酸性染料，常用的考馬斯亮藍有G250（綠色）和R250（紅色），250表示染料的純度。在酸性條件下，其可以與蛋白質(zhì)中的多個氨基酸(如賴氨酸、精氨酸等)結(jié)合形成復(fù)合物。兩者都是通過疏水作用和靜電引力與蛋白質(zhì)結(jié)合，但側(cè)重點略有不同：
G250：在游離態(tài)（紅棕色）時，其疏水區(qū)域暴露。當(dāng)遇到蛋白質(zhì)的疏水口袋時，它嵌入其中，同時其帶正電的基團與蛋白質(zhì)帶負電的區(qū)域（如天冬氨酸、谷氨酸殘基在酸性條件下）發(fā)生靜電吸引。結(jié)合后，其電子結(jié)構(gòu)改變，吸收光譜發(fā)生紅移，從紅棕色變?yōu)樗{色。顏色變化明顯是其定量應(yīng)用的關(guān)鍵。
R250：在酸性甲醇溶液中呈藍色。染色時主要依靠疏水作用嵌入蛋白質(zhì)的疏水區(qū)域。