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今天分享腎上腺皮質激素類藥物-達格列凈特定雜質溶液穩(wěn)定性研究分享，達格列凈是一是一種競爭性葡萄糖協(xié)同轉運蛋白2 (SGLT2) 抑制劑，可導致尿液中葡萄糖的排泄，用于糖尿病 (DM) 的研究。

在本次實驗中，我中心參照國家藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布的《達格列凈》進口注冊標準中“有關物質”項下所使用的色譜條件對達格列凈地四個特定雜質進行了溶液穩(wěn)定性研究，所用樣品貨號及結構式如下如圖1和圖2：

圖1：本次研究所用雜質貨號及結構式

圖2：原料藥及標準收錄的雜質代碼和本次研究所用雜質貨號對應關系圖

在本次實驗中，實驗員將RM-D021016(達格列凈α異構體)、RM-D160722（恩格列凈過氧化物）、RM-D160712（去乙基達格列凈）和RM-D160713（代碼BMS-801575）各取適量，分別放置在pH=A、B、C的溶液中，分別于0、1、2、4、8、12、24左右進樣檢測，發(fā)現(xiàn)RM-D021016、RM-D160712和RM-D160713三個樣品在pH=A、B、C的溶液中放置24小時的過程中主峰峰面積變化不大，可以認為RM-D021016、RM-D160712和RM-D160713三個樣品在pH=A、B、C的溶液中放置24小時的過程中是比較穩(wěn)定的，這三個樣品在各pH值條件下每個檢測點主峰峰面積數(shù)據(jù)如下：

圖3：樣品RM-D160712的溶液穩(wěn)定性數(shù)據(jù)匯總折線圖

圖4：樣品RM-D160713的溶液穩(wěn)定性數(shù)據(jù)匯總折線圖

圖5: 樣品RM-D021016的溶液穩(wěn)定性數(shù)據(jù)匯總折線圖

在本次研究中，我們發(fā)現(xiàn)重點觀測的雜質達格列凈過氧化物RM-D160722在《達格列凈》進口注冊標準中“有關物質”項下所使用的色譜條件下出了雙峰，于是本次研究通過開發(fā)方法在LCMS上檢測了這兩個色譜峰的分子量，發(fā)現(xiàn)兩個色譜峰對應的MS峰的分子量相同，所以達格列凈過氧化物RM-D160722在《達格列凈》進口注冊標準中“有關物質”項下所使用的色譜條件下出雙峰的原因應該是由樣品分子中的手性碳原子的異構所引起的：

圖6:達格列凈過氧化物雜質的手性碳原子示意圖

圖7：達格列凈過氧化物雜質的LCMS圖譜

圖8：達格列凈過氧化物雜質的MS分子量示意圖（正離子）

圖9：達格列凈過氧化物雜質的MS分子量示意圖（負離子）

從圖8和圖9可以看出，在正離子模式下，兩個色譜峰都出了[M-OH]的分子量，在負離子模式下，兩個色譜峰都出了[M+HCOOH]的分子量，所以從lc-ms數(shù)據(jù)可以驗證前面的想法。

在后續(xù)穩(wěn)定性檢測的過程中，我們發(fā)現(xiàn)在達格列凈過氧化物RM-D160722在pH=A、B、C的溶液中放置24小時的過程中，兩個色譜峰的面積均有不同程度的降解，所以在將溶液放置N天后再次進樣，發(fā)現(xiàn)樣品均出現(xiàn)較多降解，其中以pH=A與pH=C條件下的樣品降解明顯，數(shù)據(jù)匯總折線圖如下所示：

圖10：達格列凈過氧化物在pH=A、B、C的溶液中的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)圖

圖11：達格列凈過氧化物在不同pH溶液中放置不同時間后的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)3D圖

從以上數(shù)據(jù)可以看到，達格列凈過氧化物RM-D160722在pH=A、B、C的溶液中放置N天的過程中，會發(fā)生不同程度的降解，尤其是在pH=A和pH=C的溶液中降解明顯，所以客戶在使用該樣品時應注意避免用相關酸堿性溶液配制樣品，盡量現(xiàn)配現(xiàn)測，在儲存時應注意以防發(fā)生降解。

除此之外，本中心還對達格列凈過氧化物進行了不同溫度下的溶液穩(wěn)定性實驗，如果客戶對該樣品的穩(wěn)定性內容有需要，可以向本公司咨詢。